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热应激对畜禽的危害越来越受到广泛关注,研究者们都试图从多方面(遗传和营养)研究其缓解措施。目前,具有“营养”和“药用”双重价值的“中草药”逐步被应用于畜牧生产。大量临床试验表明柴胡提取物具有增加体表血液循环,降低体核温度的功能,在禽类生产中主要应用于清热解毒,但是在反刍家畜生产中的应用效果未见报道;因此,本研究探柴胡提取物缓解奶牛热应激应用效果。1.柴胡皂苷(SSA)对体外瘤胃发酵的影响。采用完全随机试验设计,在0.5gTMR中分别添加0、0.25、0..5和1.0mg/g的SSA,通过AGRS-Ⅲ微生物发酵微量产气自动记录仪在39℃条件下进行48h体外发酵,利用实时定量PCR (RT-PCR)检测发酵液中菌群相对数量的变化。结果表明,0.25g/kg的SSA提高了干物质降解率(DMD, P=0.08)和总产气量(GP,P<0.05),并提高了发酵液中挥发酸(VFA)的含量(P<0.05),而0.5和1.0g/kg的SSA对GP和DMD没有显著的影响,但是提高了乙酸和总挥发酸的含量(P<0.05)。SSA的添加提高了白色瘤胃球菌(Ruminococcus albus)和牛链球菌(Streptococcus bovis)的相对数量(P<0.05);但降低了短普雷沃氏菌(Prevotella brevis)和噬淀粉瘤胃杆菌(Ruminobacter amylophilus)的相对数量(P<0.05)。因此,SSA有利于调控微生物体外发酵参数,0.25~1.0/kg的SSA提高了体外GP和VFA浓度,并改变了发酵液中功能细菌的相对数量。2.柴胡提取物(RBE)缓解奶牛热应激的效果:根据产奶量、泌乳天数以及胎次等相近的原则,将40头健康的中国荷斯坦泌乳奶牛随机分为4组,以奶牛基础日粮中添加RBE为试验处理,设置4水平即0、0.25、0.5和1.0g/kg的提取物(DM基础)。试验期10周,试验期间牛舍每周平均温湿指数(THI)≥72,因此该试验是在奶牛HS条件下完成。结果表明,RBE对热应激奶牛体况没有显著影响,但降低了呼吸频率,其中0.5g/kg添加量对呼吸频率降低幅度最大(P<0.05);添加RBE均降低奶牛的直肠温度,尤其在14:00时效果最显著(P<0.01);此外,添加RBE提高了奶牛干物质采食量和泌乳性能(P<0.05),其中,0.25和0.5g/kg剂量提高产奶量、4%乳脂校正乳和能量校正乳以及饲料转化率(P<0.01);虽然RBE对奶牛的乳品质没有影响,但是0.25和0.5g/kg的添加量提高了乳脂产量(P<0.05)和乳蛋白产量(P<0.01)。添加RBE对热应激奶牛的瘤胃发酵和营养物质消化率没有负面影响,但降低了瘤胃液中纤维素酶活性。RT-PCR结果显示,RBE对HS奶牛瘤胃主要纤维分解菌并没有显著的影响,而降低(P<0.05)溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolven)和短普雷沃氏菌(Prevotella brevis)的相对数量,并有降低栖瘤胃普雷沃氏菌(Prevotella ruminicola)的趋势(P=0.05)。DGGE图谱显示,RBE并没有引起条带显著性差异,但处理间图谱相似性不高,均低于0.54,且1.0g/kg的添加量降低了香农多样性指数,而0.5和1.0g/kg的添加量则提高了菌群优势度指数(P<0.05);因此,RBE缓解奶牛HS并提高其泌乳性能,且适宜添加量为0.25~0.5g/kg,并对瘤胃菌群多样性没有改变。综上所述,SSA可以优化瘤胃体外发酵参数,奶牛日粮中添加RBE可以缓解热应激状态,并提高其泌乳性能,且对瘤胃和机体健康没有负面影响。