电针对脑缺血损伤大鼠内源性神经干细胞影响的机理研究

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目的:观察针刺和电针对成年大鼠脑缺血损伤后神经干细胞增殖、分化的影响,并比较针刺与电针之间的作用差别。从干细胞角度,探讨针灸治疗缺血性中风的可能机制。方法:大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO),针灸治疗28天后,运用神经功能缺损评分和HE染色观察动物的神经功能症状与脑梗死病理改变;免疫组化观察大鼠缺血侧海马齿状回(DG)、室管膜下区(SVZ)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),巢蛋白(Nestin)的改变,检测脑缺血后神经干细胞的数量及其增殖;酶联免疫吸附实验观测神经生长因子(NGF)的含量,检测针灸对脑内NGF的影响;逆转录聚合酶链反应测定胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Nestin、神经元特异烯醇化酶(NSE)的改变,检测脑缺血后神经干细胞的数量及其增殖、分化,从而评价针刺和电针对脑缺血损伤后神经干细胞的作用。结果:(1)神经功能评分显示:与模型组比较,针刺组、电针组恢复快。(2)HE染色显示:与模型组比较,针刺组、电针组组织细胞损伤轻。(3)免疫组化显示:与模型组比较,针刺组、电针组的BrdU和Nestin光密度比值更高。(4)ELISA结果显示:与模型组比较,针刺组、电针组脑组织含更多的NGF。(5)RT-PCR结果显示:与模型组比较,针刺组、电针组GFAP mRNA表达下降;Nestin mRNA、NSE mRNA表达升高。结论:(1)针刺和电针能促进MCAO大鼠肢体功能康复。(2)针刺和电针能促进MCAO大鼠脑内NGF产生。(3)针刺和电针能促进MCAO大鼠DG区和SVZ区神经干细胞的增殖和分化。(4)电针对MCAO大鼠神经干细胞的影响优于针刺。(5)针灸能促进脑缺血后神经干细胞的激活、增殖、分化,促进神经细胞的代偿性修复,这可能是针灸治疗缺血性脑中风的重要作用机制之一。
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