【摘 要】
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大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一,目前发病率有逐年上升的趋势,尽管治疗方法有了很大的进步,但总体死亡率仍然很高。肿瘤的侵袭和转移是患者死亡的主要原因之一。资料
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大肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤之一,目前发病率有逐年上升的趋势,尽管治疗方法有了很大的进步,但总体死亡率仍然很高。肿瘤的侵袭和转移是患者死亡的主要原因之一。资料显示临床上约有50%的大肠癌患者虽然经过有效的治疗,但最终仍然死于肿瘤的侵袭和转移,因而,针对大肠癌侵袭和转移机制的研究已经成为热点。大量研究发现,细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在肿瘤侵袭和转移的过程中起着重要的作用,它不仅是肿瘤细胞赖以生存的场所,而且还是肿瘤细胞移动所遇到的天然屏障。细胞外基质成分的改变或转换速率的加快均是肿瘤细胞侵袭和转移的生化基础,本研究从临床病理入手,用分子生物学理论和方法探讨细胞外基质环境对大肠癌转移的影响及特点并揭示其分子机制。 1.β-D-半乳糖苷酶和基质金属蛋白酶-9 在消化道黏膜的分布相关性及在肿瘤中的变化特点 目的:探讨β-D-半乳糖苷酶和基质金属蛋白酶-9 在消化道中的分布及在肿瘤组织中的活性变化及其与肿瘤转移的关系。方法: 1.GAL 活性测定方法的建立:(1)酶提取液的制备:刮取粘膜组织按5ml/mg 加入提取液(10mmol/L 磷酸缓冲液,pH6.5)制备匀浆。取上清液进行蛋白定量。(2)GAL 活性的测定:酶提取液蛋白含量测定用改良酚试剂法,以牛血清白蛋白为标准物。在总体积为1ml 的0.1mol/L 柠檬酸反应缓冲液(pH4.5)体系中含0.8μmol 的邻硝基苯β-D-吡喃半乳糖(ONPG),酶提取液适量,相当于2mg 左右蛋白质。酶活力单位U 定义为标准条件下(pH4.5, 37℃)每分钟催化生成1μmol 产物邻硝基苯酚(ONP)所需的酶量为1 个单位。在相同条件下,对该方法的精密度、重复性、灵敏度、线性关系及回收率进行评价。2.人消化道各区段粘膜中GAL 活性的测定:行根治性手术的消化道
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