慢性乙型肝炎脾虚湿热证和脾胃湿热证microRNA差异性表达的验证研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:ncsjc
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目的:  基于课题组前期对慢性乙型肝炎脾虚湿热证、脾胃湿热证相关的microRNA基因芯片筛选结果,探究microRNA与慢性乙型肝炎脾胃湿热证、脾虚湿热证表达的关系。验证与慢性乙型肝炎上述两个证型相关的特异性microRNA的表达,在此基础上进一步了解慢性乙型肝炎上述两个证型特异性microRNA的调控机理,为慢性乙型肝炎分型辨证提供客观化生物学依据,旨在建设规范化和客观化的慢性乙型肝炎证候诊断标准。  方法:  从本课题组前期的研究结果中筛选出慢性乙型肝炎脾虚湿热证显著性差异表达的4条 microRNA(hsa-miR-1587、hsa-miR-4800-5p、hsa-miR-4466、hsa-miR-494 );慢性乙型肝炎脾胃湿热证中有显著性差异表达的2条microRNA(miR-1273g-3p、miR-4419b)。使用qRT-PCR ( TaqMan探针)技术对慢性乙型肝炎13例脾虚湿热证患者和13例健康对照者的血浆中microRNA的表达进行检测。使用qRT-PCR ( TaqMan探针)技术对慢性乙型肝炎13例脾胃湿热证患者和13例健康对照者血浆中microRNA的表达进行检测。对实验中出现的相关数据资料使用SPSS 19.0软件分析。  结果:  1. 同健康对照组比较,慢性乙型肝炎脾虚湿热证组中的 hsa-miR-494、hsa-miR-4466 表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05) ,此研究结果与前期microRNA基因芯片筛选结果一致;hsa-miR-1587、hsa-miR-4800-5p表达下调,差异无统计学意义(P>0.05)。  2. 同健康对照组比较,慢性乙型肝炎脾胃湿热证组中的miR-1273g-3p的表达上调;且差异有统计学意义(P<0.05),此研究结果与前期microRNA基因芯片筛选结果一致;而miR-4419b的表达上调,差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:  1. 本研究验证了hsa-miR-494、hsa-miR-4466与慢性乙型肝炎脾虚湿热证具有一定的相关性,可能为慢性乙型肝炎脾虚湿热证的潜在生物学诊断标志物。主要通过免疫调节、炎性反应、P38 MAPK信号通路、PD-1/PD-L1通路等过程参与调控。  2. 本研究验证了 miR-1273g-3p 与慢性乙型肝炎脾胃湿热证具有一定的相关性,可能为慢性乙型肝炎脾胃湿热证的潜在生物学诊断标志物。通过免疫应答、炎症损伤、蛋白质代谢等过程参与调控。
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