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目的: 观察艾灸对佐剂性关节炎模型(AA)大鼠“足三里”穴位局部血流影响的特征性改变,从AT1、TRPV2角度探讨艾灸对AA模型大鼠“足三里”穴位局部血流的调控机制。 方法: (1)将 Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、模型+艾灸组,以完全弗氏佐剂(FCA)诱导建立AA大鼠模型。其中,模型+艾灸组在左侧“足三里”穴位局部进行温和灸干预,每日1次,共15次。采用激光多普勒血流监测技术(LDF)对“足三里”穴位局部血流进行监测,观察艾灸对“足三里”穴位局部血流灌注量(PU)、移动的血细胞聚集程度(CMBC)、移动的血细胞平均移动速度(V)的影响;采用酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫组化(IH)、蛋白免疫印迹(WB)检测“足三里”穴位局部AT1、TRPV2的表达量的变化。 (2)将 Wistar大鼠随机分为模型+艾灸组、模型+AT1阻断+艾灸组、模型+TRPV2阻断+艾灸组,以完全弗氏佐剂(FCA)诱导建立AA大鼠模型,以缬沙坦灌胃的方式对大鼠进行AT1阻断,以钌红(RR)局部注射的方式对大鼠进行TRPV2阻断。三组均在左侧“足三里”穴位局部进行温和灸干预,每日1次,共15次。采用激光多普勒血流监测技术(LDF)对“足三里”穴位局部血流进行监测,观察艾灸对“足三里”穴位局部血流灌注量(PU)、移动的血细胞聚集程度(CMBC)、移动的血细胞平均移动速度(V)的影响;采用酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫组化(IH)、蛋白免疫印迹(WB)检测“足三里”穴位局部AT1、TRPV2的表达量的变化。 结果: (1)1.大鼠足容积检测结果发现:AA模型建立之后,与空白组相比,足容积明显增大(P<0.01);在施加艾灸之后,足容积明显减小(P<0.01)。 2.经局部血流指标监测结果发现:空白组的三项血流指标均较平稳,呈缓慢下降的趋势;模型组三项血流指标均高于空白组(P<0.01),呈较平稳走势;模型+艾灸组的血流灌注量(PU)和移动的血细胞的移动速率(V)均高于模型组(P<0.01),但移动的血细胞的聚集程度(CMBC)有所下降,并呈先上升、后下降的特征性变化。 3.经酶联免疫吸附(ELISA)、免疫组织化学(IH)、蛋白免疫印迹(WB)检测结果发现:模型+艾灸组局部AT1表达量明显低于模型组(P<0.01)。(2)1.经局部血流指标监测结果发现:模型+AT1阻断+艾灸组的三项血流指标均有较大波动,明显高于模型+艾灸组和模型+TRPV2阻断+艾灸组(P<0.01),并呈明显上升趋势,艾灸结束后仍保持高灌注量状态;模型+TRPV2阻断+艾灸组三项血流指标均低于模灸组(P<0.01),波动不明显,趋势较平稳。 2.经酶联免疫吸附(ELISA)、免疫组织化学(IH)、蛋白免疫印迹(WB)检测结果发现:模型+AT1阻断+艾灸组局部AT1的表达量均明显低于模型+艾灸组(P<0.01),局部TRPV2的表达量均低于模型+艾灸组(P<0.05);模型+TRPV2阻断+艾灸组血清AT1含量明显高于模型+艾灸组(P<0.01),但局部AT1表达量没明显差异(P>0.05),血清及灰度值显示,TRPV2的表达量均低于模型+艾灸组(P<0.01),局部的蛋白相对表达量低于模型+艾灸组,但没有明显差异(P>0.05)。 结论: 1.艾灸可以有效改善“足三里”穴位局部血流,并呈先上升、后下降的特征性改变。 2.AT1、TRPV2均参与艾灸对“足三里”穴位局部血流的调控,主要表现为艾灸抑制AT1的表达和对TRPV2的激活。 3.阻断AT1之后,TRPV2有所下降,阻断TRPV2之后,血清中的AT1有所上升,认为 AT1、TRPV2在艾灸对“足三里”穴位局部血流调控中存在一定的相关性。