功能性消化不良脾虚证动物模型制作及评价方法研究

来源 :北京中医药大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:liongliong493
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功能性消化不良作为一种临床常见的功能性胃肠病,其临床表现与以消化不良为主要表现的脾虚证极为相似,而在临床中,功能性消化不良往往结合脾虚证的症状,因此,从病证结合的角度研究功能性消化不良脾虚证有重要意义。国内外关于功能性消化不良脾虚证病证结合的研究很少,且临床研究居多,因此有必要从病证结合的角度建立及评价功能性消化不良脾虚证动物模型。本论文将从文献综述、理论研究及实验研究探讨建立及评价功能性消化不良脾虚证动物模型。理论研究:目的:探讨建立及评价功能性消化不良脾虚证动物模型。方法:系统查询并研究功能性消化不良及脾虚证相关文献,提出构建功能性消化不良脾虚证动物模型,根据实验结果,完善功能性消化不良脾虚证动物模型的制作及评价方法。结果:查询功能性消化不良文献,大多数文献的制作方法存在不足,不符合功能性消化不良罗马Ⅲ诊断标准,且缺少评价方法,在国内外文献中,功能性消化不良与中医证型相联系的,往往是与肝结合,缺少功能性消化不良脾虚证动物模型。脾虚证动物模型造模方法繁多,模型评价不统一,因此,依据大量文献的情况下,功能性消化不良脾虚证动物模型的建立与评价原则为:动物模型必须兼具功能性消化不良及脾虚证的特点。结论:劳倦过度是脾虚证常见病因,内脏敏感性增高是功能性消化不良重要的发病机制,故我们在采用碘乙酰胺灌胃制作功能性消化不良疾病模型的基础上,运用北京中医药大学中医诊断系的小平台站立法施加劳倦过度这一中医常见致病因素,从病证结合的角度成功制作功能性消化不良脾虚证动物模型。实验研究:目的:制作及评价功能性消化不良脾虚证动物模型。方法:将本实验分为两个部分,分别为:制作并评价功能性消化不良脾虚证动物模型,选出优质模型;运用香砂六君子汤加减进行药物反证。在第一个实验中,我们采用健康Spargue-Dawley雄性乳鼠180只,出生6天。共18笼,每笼10只,带1只母鼠,适应性饲养4天。到第10天,180只大鼠,平均分为对照组(90只)和模型组(90只)。对照组90只,2%蔗糖溶液灌胃,0.2ml/只;模型组90只,0.1%碘乙酰胺蔗糖溶液灌胃,0.2ml/只。连续造模6天,至大鼠3周龄时断奶,分笼,3-4只大鼠/笼。造模后至6周龄进行正常饲养。大鼠6周龄时进行随机分组,对照组随机分组为:正常组(n=45)、小平台组(n=45);模型组随机分组为:碘乙酰胺组(n=45)、碘乙酰胺加小平台组(n=45)。小平台组及碘乙酰胺加小平台组大鼠每天17:00-7:00进行小平台站立,连续造模14天。每天运用功能性消化不良脾虚证评价量表记录观察大鼠的毛发、活动情况、体重、进食量、饮水量、粪便形态等症状体征,记录大鼠的拉尾排便阳性率,检测避暗实验的错误次数及潜伏期,造模结束后腹主动脉取血,离心取血清,测定大鼠血清淀粉酶、乳酸、D-木糖及胃动素。在第二个实验中,我们使用功能性消化不良脾虚证型常用方剂:香砂六君子汤加减,进行药物反证,根据第一个实验的实验结果,我们选取碘乙酰胺加小平台组作为本实验的优选模型,随机分为6组,分别为中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组、西药组、模型组、正常组。中药大剂量组(n=7):0.2ml/kg香砂六君子汤灌胃7天;中药中剂量组(n=7):0.1ml/kg香砂六君子汤灌胃7天;中药小剂量组(n=7):0.05ml/kg香砂六君子汤灌胃7天;西药组(n=7):吗丁啉灌胃7天;模型组(n=7):1ml/100g纯净水灌胃7天;正常组(n=10):lml/100g纯净水灌胃7天。每天运用功能性消化不良脾虚证评价量表记录观察大鼠的毛发、活动情况、体重、进食量、饮水量、粪便形态等症状体征,记录大鼠的拉尾排便阳性率,造模结束后腹主动脉取血,离心取血清,测定大鼠血清淀粉酶、乳酸、D-木糖、胃动素。结果:在第一个实验中,通过量表症状体征观察及指标检测,在造模14天后,碘乙酰胺加小平台组大鼠出现神疲乏力、嗜睡懒动、毛发疏松不泽、体重增加缓慢等症状。拉尾排便阳性率高于正常组,与正常组比较有统计学意义P<0.05;血清淀粉酶活性降低,与正常组相比P<0.05;乳酸含量增高,与正常组相比P<0.05;血清D-木糖含量降低,与正常组相比P<0.05。因此我们可以认为碘乙酰胺灌胃及小平台站立是符合功能性消化不良脾虚证动物模型的造模要求。在第二个实验中,运用香砂六君子汤进行治疗,中药大剂量组、中药中剂量组、中药小剂量组大鼠的症状表现都有明显的改善,大便趋于正常,无神疲乏力的表现,毛发较为光泽整洁,体重增加较快,进食量增加较快。中药大剂量组与中药中剂量组的血清淀粉酶、乳酸含量、胃动素含量接近于正常组,因此可以认为香砂六君子汤加减治疗有效。结论:碘乙酰胺灌胃加小平台站立造模方法是符合功能性消化不良脾虚证病因、病机、病程的,是合格的功能性消化不良脾虚证动物模型的制作方法。
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