基于上转换纳米材料的杂环胺IQ荧光免疫检测方法

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本研究以上转换纳米材料为信号标记物,基于抗原抗体的特异性识别作用,建立了两种荧光免疫检测方法,实现了对热加工肉制品中的2-氨基-3-甲基咪唑[4,5-f]喹啉(IQ)的快速定量检测。以热分解法、配体交换法制备了亲水性上转换纳米材料(PAA-Na YF4:Yb,Er UCNPs)。将PAA-UCNPs与IQ抗体偶联制备信号探针,将磁性微球与包被原偶联制备捕获探针,建立了基于上转换纳米材料标记-磁分离的IQ荧光免疫检测方法。经过优化,确定方法最佳工作条件为,信号探针添加量为25μL,捕获探针添加量为25μL,样品溶液添加量为50μL,孵育时间50 min。方法的线性范围为0.01-100μg·L-1,检测限为0.007μg·L-1,方法特异性良好。该方法测得煎炸的鸡肉样品中IQ含量为2.11-3.47μg·kg-1,煎炸鱼肉样品中IQ含量为1.35-2.85μg·kg-1,该结果与超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的验证结果接近(R~2=0.977),方法可用于实际样品中IQ的定量检测。利用氧化石墨烯与上转换纳米材料之间的荧光共振能量转移,建立了基于上转换纳米材料-氧化石墨烯荧光共振能量转移的IQ免疫检测方法。经过优化,确定方法最佳工作条件为,信号探针添加量为10μL,氧化石墨烯添加量为50μL,样品溶液添加量为50μL,目标物与信号探针孵育时间40 min,猝灭时间10 min。方法的检测限为0.057μg·L-1,线性范围为0.1-100μg·L-1,方法特异性良好。该方法测得煎炸鸡肉样品中IQ含量为1.77-3.26μg·kg-1,煎炸鱼肉样品中IQ含量为0.95-3.16μg·kg-1,该结果与UPLC-MS/MS验证结果接近(R~2=0.976),方法可用于实际样品中IQ的定量检测。
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