背景:血管重构是高血压以及其他多种心血管疾病常见并发症和病理基础,越来越多地被作为心血管疾病的主要风险指标,有效预防和抑制血管重构对于控制高血压等多种心血管疾病发生发展有着不可忽视的积极作用,可延缓疾病进程,是预防甚至治疗高血压等心血管疾病的潜在手段和研究方向。当前,应用于临床的抗高血压药种类繁多,但针对性治疗血管重构药物却相对欠缺,不能有效去除致病因或彻底抑制发病机制,逆转或抑制疾病进程,因此,研究和发现新的安全有效的旨在控制高血压血管重构的针对性治疗药物就显得尤为重要和迫切了。传统中药在心血管疾病治疗中发挥着不可替代的重要作用,文献报道,中药乳香(Boswellia Species)可在心血管疾病中发挥保护作用,抑制血管纤维化和重构,保护血管。11-羰基-β乙酰乳香酸(AKBA)是从乳香树脂中提取得五环三萜类化合物,是乳香提取物中的抗炎抗氧化活性最强的成分之一,安全无毒副作用。已有研究表明,乳香酸基于其良好的抗炎抗氧化作用,可作用于纤维化因子TGF-β和MMPs活化表达,从而在组织重构和纤维化进程中发挥良好的保护作用。例如,乳香酸可以有效地减少TGF-β1表达,从而缓解TGF-β1诱导的肺动脉纤维化过程;抑制TGF-β1/Smad3信号通路,而减少结肠纤维化;另外,AKBA在动脉粥样硬化血管病变过程中表现出了良好抗炎作用,可有效抑制NF-κB介导的炎性反应,减少MMPs活化分泌,从而减少血管内膜损伤,起到血管保护作用。转化生长因子1(TGF-β1)和基质金属蛋白酶(MMPs)在血管重构过程中起到重要作用。TGF-β1过度活化会导致血管外膜成纤维细胞活化,从而导致细胞外基质分泌增加、胶原沉积,同时还会引起MMPs活化,彼此反馈调节,引起血管细胞分化迁移以及血管组织破坏和重建。与此同时大量证据表明,内源性的活性氧(ROS)和炎性因子是引起TGF-β1和MMPs过度表达的关键因子,通过抑制体内过多的ROS和炎性反应则可以较好的抑制或逆转血管重构,从而起到血管保护作用。因此,我们认为AKBA同样能在自发性高血压大鼠胸主动脉的血管重构中,发挥良好的抗炎抗氧化作用,抑制内源性ROS和炎症,进而有效调节纤维化因子TGF-β1和MMPs的表达活化,从而发挥良好抗纤维化以及抑制血管重构作用,保护血管。目的:1.探讨AKBA对高血压血管重构的保护作用。2.阐明AKBA在血管重构过程中的作用机制。方法:实验分为自发性高血压大鼠体内药效学验证和成纤维细胞体外机制探讨。a)动物实验采用自发性高血压6周龄雄性大鼠,口服灌胃分别给予AKBA(20,40mg/kg),为期8周,初步评价AKBA药理作用。1.尾套管法监测大鼠血压。2.血流变学全血粘度检测。3.生化检测AKBA对血管收缩性物质和体内炎症氧化状态的影响。4.H&E染色观察和分析大鼠胸主动脉形态学改变情况。5.马森染色评估血管壁胶原沉积情况。6.免疫荧光和免疫组化分别检测TGF-β1/Smad3和MMP2表达水平。b)体外细胞实验采用AKBA(1,2,4μM)预处理血管外膜成纤维细胞1h,然后给予Ang II(0.1μM)24h。1.ELISA检测细胞培养上清液中炎性因子和TGFβ-1分泌水平。2.流式检测Ang II刺激下ROS含量。3.MTT检测Ang II刺激下细胞活性。4.Transwell检测Ang II诱导的细胞迁移水平。5.免疫印迹法检测AKBA干预过程中对TGF-β1和MMPs通路的影响,分别检测TGF-β1/Smad3,P-Smad3,Smad7和MMP2/9等蛋白表达情况。结果:实验结果显示,AKBA在体内外可发挥良好的抗炎抗氧化作用,进而有效抑制纤维化因子TGF-β1和MMP2/9活化表达,显著改善血管重构情况。1.动物实验表明,在自发性高血压早期,SHR就已经遭受到轻微的血管收缩,炎症反应,较为严重的氧化应激反应和明显的血管重构。相比WKY组,SHR胸主动脉壁横切面积,血管壁中层厚度以及厚度/官腔比值都明显增高(P<0.05)。AKBA不能有效逆转血压和全血粘度增高状态,但却能有效降低体内炎症和氧化应激水平,恢复血管收缩舒张物质平衡。更重要的是,AKBA可有效抑制血管重构,恢复血管正常形态,减少胶原在血管壁的沉积,其次AKBA还明确地减少了纤维化因子TGF-β1/Smad3和MMP2在血管壁的表达。2.体外成纤维细胞中,AKBA显著改善Ang II诱导的炎症氧化应激反应,减少炎性因子的表达,降低细胞内ROS的产生,同时,减少因Ang II刺激引起的细胞过度活化和迁移。免疫印迹结果显示AKBA能有效地调节纤维化进程,降低细胞提取物中TGF-β1/Smad3,P-Smad3,Smad7和MMP2/9的蛋白表达水平。结论:1.AKBA基于其良好的抗炎抗氧化作用,在高血压血管重构过程中发挥良好的血管保护作用,减少血管重构。2.AKBA可有效抑制促纤维化因子TGF-β1和MMP2/9活化表达,阻止组织纤维化进程,从而在血管重构过程中发挥保护作用。3.本实验证明,AKBA可作为辅助用药用于高血压血管重构的针对性治疗,为高血压的预防和治疗提供新的候选药物。