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显脉香茶菜(Rabdosia nervosa)广泛分布于我国的广西、广东、贵州、浙江等地,本研究通过对其化学成分和抑菌活性进行研究,拟从中寻找活性成分,为植物源杀菌剂的研究开发提供理论基础和科学依据。
显脉香茶菜甲醇提取物抑菌活性表明,显脉香茶菜甲醇提取物在2500μgml/L浓度下对11种常见的植物病原真菌具有抑制作用,其中对黄瓜疫霉菌(Phytophthora melonis)和荔枝霜疫霉菌(Peronophthora litchi)抑制作用最为显著,抑制率分别为69.16%和58.24%,对水稻纹枯菌(Rhizoctonia solani)、黄瓜炭疽菌(Phytophthora melonis)、番茄小核菌(Sclerotium rolfsii)、香蕉枯萎菌(Fusarium oxysporum fsp.cubense)、香蕉炭疽菌(Colletotrichum musae)均有一定的抑制作用,抑制率分别为:49.58%、40.91%、39.74%、33.62%和33.12%,对芒果炭疽菌抑制作用最差,仅为6.28%。
对显脉香茶菜各萃取物的活性测定表明,显脉香茶菜活性成分主要集中在氯仿萃取物中,在625μgml/L浓度下对黄瓜疫霉菌抑制率为70.11%;对荔枝霜疫霉菌的抑制率为61.96%。
采用硅胶柱层析、凝胶柱层析、反相柱层析、重结晶等方法,结合核磁共振技术(1H NMR、13C NMR、DEPT)、质谱(MS)等技术对显脉香茶菜氯仿萃取物的化学成分进行了分离和鉴定。从中分离鉴定出毛栲利素、nocfosin、延命草素、溪黄草甲素、表诺多星醇、冬凌草甲素、山楂酸、委陵菜酸、2α—3α—23—三羟基—12—烯—28—齐墩果酸、齐墩果酸、乌苏酸11个化合物的结构,结构类型主要涉及到对映贝壳杉烷型二萜、齐擞果烷型五环三萜和乌索烷型五环三萜。延命草素、委陵菜酸和2α—3α—23—三羟基—12—烯—28—齐墩果酸(2α,3α,24-Trihydroxyolean—12—en—28—oic acid)三个化合物首次从该植物中分离到。
20μgml/L浓度下化合物毛栲利索、nodosin、延命草素、溪黄草甲素、表诺多星醇、冬凌草甲素对黄瓜疫霉菌的抑制率分别为54.61%、42.73%、75.5%、59.84%、51.11%和24.13%,冬凌草甲素抑制作用最为显著,优于相同浓度的甲霜灵,差异性显著;对荔枝霜疫霉菌的抑制率分别为49.52%、19.45%、76.81%、10.29、2.63%和7.09%,冬凌草甲素抑制率最高,与5μgml/L浓度下甲霜灵的抑制作用相当,差异不显著。
20μgml/L浓度下冬凌草甲素处理120h后的黄瓜疫霉菌菌丝体和荔枝霜疫霉菌菌丝体均出现过度分支或膨大等现象,尤其是黄瓜疫霉菌。
显脉香茶菜资源丰富,从中分离出的冬凌草甲素等化合物具有良好的抑菌活性,值得进一步研究。