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随着食源性疾病的不断爆发,食品安全问题已成为对公共健康的重大挑战和威胁,建立对食源性致病菌快速、灵敏的检测系统是防治食源性疾病,避免人类生命财产损失的重要方法。本文以一种重要而常见的致病菌—大肠杆菌O157:H7为检测对象,研究了基于纳米金颗粒和蛋白A分子的压电免疫传感器的构建方法和其对目标菌的检测效果,将纳米技术与生物传感器检测方法结合,以综合提高传感器的性能。主要研究内容和成果如下:(1)构建了基于纳米金颗粒和蛋白A分子的压电免疫传感器。研究了QCM金电极的清洗方法和稳定性测试,选择了气相法作为传感器检测方法;分析了HDT自组装方法和自组装时间与频率响应值间的关系;制备了纳米金颗粒并对颗粒形态、大小进行紫外可见分光光度和透射电镜表征,对纳米金颗粒在QCM金电极表面的固定量与频率变化关系进行了理论推导;(2)分别以滴加法和浸没法进行蛋白A分子和抗体分子的固定,结果表明低浓度高剂量的浸没法对生物分子的固定效果要好于高浓度低剂量的滴加法;此后对电极表面的封闭问题进行了研究,使用不同浓度的BSA-PBS溶液封闭电极表面的空白位点和非特异性结合位点,实验证明5 mg/mL的BSA的封闭效果较好;(3)采用四种抗体固定方法:裸金电极直接固定法、单独使用蛋白A分子固定法、单独使用纳米金颗粒固定方法和纳米金颗粒-蛋白A分子联用固定方法使抗体固定于QCM金电极表面,对大肠杆菌O157:H7进行检测,通过比较检测效果得知基于纳米金颗粒和蛋白A分子的检测方法可以获得最好的检测效果,其蛋白A分子活性和对抗体的固定率最佳;(4)对不同浓度的大肠杆菌O157:H7溶液检测,实验结果表明传感器可以在1.5 h内完成对目标菌的检测,当菌液浓度范围在102-105 CFU/mL时,该压电免疫传感器有着良好的线性关系,其浓度对数值-频率变化值的回归方程为:y=73.7x-142.56,相关系数R=0.9914,该传感器对大肠杆菌O157:H7的检测限为102 CFU/mL;(5)以大肠杆菌DH5α作为验证菌检验了传感器的灵敏度,实验结果表明传感器对验证菌没有产生明显的频率响应,说明该传感器的特异性和准确性良好。通过以上研究,为纳米颗粒在压电免疫传感器中的应用进行了探索,为开发快速、灵敏、准确的压电免疫传感器并将其应用于食源性致病菌的检测打下了一定理论基础,为相关领域和学科的研究提供参考。