近年来国内大型集合化养鸡场不断涌现，养鸡业成为国民的一大收入来源渠道，而疾病则是养鸡业的最大威胁，其中又以传染病危害最大，约占鸡病总数的75％以上，尤其是禽流感之类急性的高度的致死的性传染病一旦爆发，将会造成非常巨大的经济损失，甚至还会危及到人类健康，对人类造成严重威胁。目前，鸡传染病确切诊断依赖于病毒的分离鉴定、血清学检测以及分子生物学诊断技术以及电镜技术等。(1)传统的病毒分离鉴定：即病料通过细胞或鸡胚培养分离病毒，经理化特性和电镜进行鉴定，同时进行致病力测定，确定毒力强弱。(2)血清学实验技术：包括琼脂扩散实验(AGP)；血凝及血凝抑制实验(HA-HI)；神经氨酸酶抑制试验(NITT)；中和试验(NT)；免疫荧光技术(IFT)及酶联免疫吸附试验(ELISA)等；(3)分子生物学技术包括：聚合酶链反应(PCR)及反转录一聚合酶链反应(RT—PCR)；核酸探针技术；以及荧光PCR法，荧光PCR法是目前最快速的检测方法，能在4小时内快速检测。但是上述的检测方法有的耗时、费力、诊断周期长；有的需要大量的实验室工作，而且仪器设备昂贵，且不能对疫病作出早期诊断，迫切需要建立一种快速、敏感并且能通过同一套试剂对多种鸡传染病作出早期检出的诊断方法，达到及时控制疫情、减少损失的目的。本研究利用制备的抗鸡IgM单克隆抗体作为一种通用试剂初步实现了对疫苗免疫情况的监测，对鸡传染病的早期诊断研究具有重要意义。本研究以纯化的鸡IgM制成油乳剂免疫抗原免疫BALB/c小鼠，取抗体效价饺高的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合，融合率为76.25％；建立间接ELISA方法，用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体(McAb)，初检阳性率为16.39％；进行多次亚克隆及反复筛选，获得了1株能稳定分泌抗鸡IgMMcAb的杂交瘤细胞株，命名为1F7。1F7杂交瘤细胞株经过反复冻存、复苏及多次传代，均能分泌较高效价抗体，其抗体效价保持在1：1000以上；将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内7天后收集腹水，经辛酸-硫酸铵法提纯后间接ELISA检测其效价达1：32000以上。单抗生物学初步鉴定结果显示，制得的McAb具有亲和力高，特异性强等特点。乳胶凝集试验证实所分泌抗体均属IgG1、K型。本试验获得的McAb将在鸡传染病的早期检测及预报中发挥重要作用。用H5亚型禽流感油乳剂疫苗对5-10周龄的鸡进行免疫，在免疫后3-10天多次采血并收集血清，采用间接ELISA法检测血清中IgM抗体效价，具体操作步骤：1、以禽流感病毒(AIV)按最佳包被浓度包被酶标板，2、加入待检血清与之作用，3、按最佳工作浓度加入已获得的纯化抗鸡IgMMcAb，4、加入工作浓度的羊抗鼠IgG酶标抗体。由此获得鸡在免疫禽流感疫苗后开始产生抗AW的IgM抗体及抗AIV的IgM抗体效价达到最高的时间，并初步确定疫苗的免疫效果。结论：本研究成功制备了抗鸡IgM的多克隆抗体及McAb，并建立了间接ELISA法，将制备的抗鸡IgM McAb应用在疫苗免疫情况的判定上，为鸡传染病的研究提供了一种新的通用试剂，且该法具有检测灵敏度高，特异性强，准确度高，重复性好等优点，在鸡免疫的基础研究如疫苗质量的评价、IgM抗体检测等以及鸡传染病的早期诊断具有重要价值。