基于蛋白质组学解析加速老化对沙葱种子活力的影响

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沙葱是百合科葱属多年生草本植物。种子繁殖是沙葱种群繁衍最常见的方式,也是人工驯化栽培方式之一。然而,沙葱种子在成熟后,会随着储藏时间的延长容易发生老化,造成种子活力降低、萌发率下降等问题,严重影响了沙葱的开发利用和种质资源的长期保存。因此,本研究以2019年采自鄂尔多斯市鄂托克前旗草甸野生种(期间一直在4℃环境保存)为研究对象,采用高温高湿加速老化的方法,处理时间为0 h、5 h、15 h、25 h和35 h,分别用CK、T1、T2、T3、T4表示。通过测定老化过程中种子的发芽率、活力指标、矿质元素以及氨基酸含量,探究沙葱种子在老化过程中各种生理生化的变化规律;另外,利用TMT技术对未老化(CK)、轻度老化(T1)和重度老化(T4)种子进行蛋白质组学分析,通过对老化过程中差异蛋白及相关通路分析,以期为揭示沙葱种子老化机理研究提供蛋白质表达水平的证据。主要研究结果如下:随着老化时间的延长,沙葱种子萌发指标均呈现显著下降趋势;其中,在T4处理时,沙葱种子活力指数为0,其他发芽指标值也趋于0,表明沙葱种子完全失活。此外,在人工老化过程中,沙葱种子中的K+、Na+随着老化时间的延长呈先下降后上升的趋势,其中K+在T2处理时含量最低,Na+在T3处理时含量最低,且K+/Na+比值均小于对照组;Mg2+在T1处理时含量显著高于对照,并在T3处理时含量最低;Ca2+随着老化时间的延长呈先上升后下降的趋势,且在T1处理时增幅最大,至T3处理时含量最高。可见,在加速老化过程中,沙葱种子中离子含量呈不同的变化趋势。沙葱中含有丰富的氨基酸,主要有谷氨酸、精氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、缬氨酸、丝氨酸、苯丙氨酸等,其中谷氨酸含量最高。可能是老化处理使蛋白中某些热不稳定氨基酸发生破坏,引起谷氨酸含量升高。蛋白质组学分析共鉴定到4336个蛋白质,其中显著差异表达的蛋白质是291个,在T1.vs.CK中共筛选出36个差异表达蛋白,包括16个上调表达和20个下调表达;在T4.vs.CK中存在139个差异表达蛋白,其中64个显著上调,75个显著下调;T4.vs.T1中共发现116个差异表达蛋白,上调的有51个,下调的有65个。在三组对比中共有4个相同的差异蛋白,为谷胱甘肽S转移酶(Unigene0006910)、紫色酸性磷酸酶(Unigene0010352)、组蛋白(Unigene0049278)和防御素(Unigene0042879)。
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