超短波对人脐带间充质干细胞治疗兔膝骨关节炎关节液中IL-1β和TNF-α水平的影响

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目的观察超短波对人脐带间充质干细胞(Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cell,HUC-MSCs)治疗兔膝骨关节炎关节液中IL-1β和TNF-α水平的影响。方法精选26只生命体态健康的新西兰大白兔,要求均为6个月大,且为雄性,通过改良的Hulth造模法将其右后肢膝关节制成实验模型。模型制作完成后,任意选取其中的2只来检验造模是否成功。然后采用随机数表法将其余的24只实验兔分为4个小组,第一组为对照组,第二组为超短波组,第三组为干细胞组,第四组为超短波+干细胞组。第一组:制模后不予任何干预;第二组:予制模后进行15分钟微热量超短波治疗;第三组:予制模后的关节腔内注射1×10~7脐带间充质干细胞0.5ml;第四组:予制模后关节腔注射1×10~7脐带间充质干细胞0.5ml,并进行15分钟微热量超短波治疗。各小组的治疗时间均为30天。后将剩余的24只大白兔全部处死,用注射器抽取右后膝关节的关节液观察并分析,与其他实验兔相比是否存在颜色和量的区别;通过ELISA法测出其中所含有的TNF-α和IL-1β两种因子各有多少;然后按原手术路径切开关节囊,观察滑膜和关节软骨与之前相比是否发生改变;取右侧股骨内侧髁软骨,经苏木精-伊红﹙hematoxylin-eosin,HE﹚染色后,采用改良的Mankins评分对该染色软骨做出组织学评分。结果1.采用以上四种方法分别治疗实验白兔的膝骨关节炎(KOA),经过30天,呈现了不同的治疗效果。大体和病理观察结果显示第二组超短波组、第三组干细胞组和第四组超短波+干细胞组对KOA的治疗效果均明显强于第一组对照组,且第四组的疗效位居首位,最为理想;第二组和第三组的治疗程度相似。2.用不同方法对兔KOA治疗30天后,右侧股骨内侧髁软骨Mankins评分显示,与第一组对照组相比,第四组超短波+干细胞组、第三组干细胞组和第二组超短波组的结果都较低,存在的差异有统计学意义(P<0.05);与超短波组比较,干细胞组Mankins评分结果有所降低,但两组之间存在的差异无统计学意义(P>0.05);与干细胞组和超短波组对比,将两种治疗方式联合的干细胞+超短波组,Mankins评分较低,并且具有统计学意义(P<0.05)。3.从检测的TNF-α和IL-1β的含量比较来看,可以得出这样的结论:治疗30天后,与对照组比较结果显示,干细胞组、超短波组和干细胞+超短波组这三组中TNF-α和IL-1β的含量都较低,而且其间的差异明显(P<0.05);干细胞组中TNF-α和IL-1β两者的含量仅略低于超短波组,其差异无统计学意义(P>0.05);但是与干细胞组和超短波组相比较,干细胞+超短波组中的TNF-α和IL-1β的含量偏低,存在的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.改良的Hulth造模法可以成功且高效模拟人类患KOA的过程和结果,造模方法简单,易于操作,7周即可完成。2.关节腔内注射人脐带间充质干细胞及超短波均是治疗KOA的有效方法,且超短波对人脐带间充质干细胞治疗KOA方面具有显著的协同作用,这可能与二者可协同改善关节损伤部位的微环境,调节关节液中IL-1β、TNF-α含量有关;
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