流感是一种常见的以呼吸道发病为主的具有高度传染性疾病。该疾病由正粘病毒科流感病毒属中A型流感病毒引起的。流感病毒属于严格细胞内寄生物,需要借助宿主细胞内的细胞因子和合成机制来完成自身的复制。同时,病毒入侵将会引起宿主的免疫应答,来抵御病毒入侵。因此,研究病毒与宿主细胞的相互作用是一件非常重要有意义的课题,可以更好地理解宿主是如何抵御病毒入侵的,而病毒又是如何逃避宿主细胞免疫应答来完成复制的,这有助于寻找新的抗病毒靶位点。NDRG1蛋白是一种细胞质蛋白,在上皮细胞中高表达,具有多种生物学功能和调控众多细胞信号通路的调控因子,在细胞周期调控,细胞成熟、分化,血管生成,肿瘤抑制和P53介导的细胞凋亡中均起着重要作用,而抑制NF-κB信号通路活性是它一个很重要功能。因此,对NDRG1蛋白与流感病毒复制之间是否存在联系很感兴趣。本文研究了NDRG1蛋白对禽流感H5N1亚型病毒在A549细胞中复制的作用。首先,禽流感病毒进行感染A549细胞试验,用荧光定量PCR和Western Blot检测显示,接种病毒后细胞内NDRG1表达量上升,即流感病毒可以诱导细胞内NDRG1蛋白表达。接着构建了靶向NDRG1基因的RNAi载体和表达载体,通过低表达和过表达NDRG1来研究对流感病毒的复制的影响。结果发现,当NDRG1低表达时,病毒的复制能力也下降了;而过表达时病毒的复制能力也增强了。也就是说NDRG1可以促进病毒复制。最后,由于NDRG1蛋白可以通过抑制IKKβ位点来弱化NF-κB信号通路活性。因此,构建了IKKβ表达载体,通过细胞因子IFN-β、IL-8的表达水平和病毒复制能力来研究该载体是否能克服NDRG1蛋白对NF-κB信号通路的弱化作用。结果显示,IKKβ表达载体可以克服NDRG1的弱化作用,同时病毒的复制能力也下降了。从而说明NDRG1蛋白可以通过抑制NF-κB信号通路降低细胞先天免疫应答来促进病毒复制的。