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第一部分目的:探讨肝细胞粘附分子(hepaCAM)对肾癌增殖的影响及机制。方法:将携带hepaCAM基因的重组质粒转染786-0细胞,RT-PCR、western blot鉴定hepaCAM基因在786-0中的表达及其对c-Myc表达的影响;细胞计数观测细胞增殖活力变化;流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:上调hepaCAM基因表达可抑制肾癌786-0增殖,阻止细胞周期于G0/G1期,并伴随着c-Myc蛋白表达降低。结论:上调hepaCAM基因可抑制肾癌786-0增殖,并下调c-Myc蛋白表达而对c-Myc基因水平无影响,说明hepaCAM抑制肾癌增殖可能是通过调节c-Myc翻译后水平实现的。第二部分目的:探讨c-Myc特异性小分子抑制剂10058-F4对肾癌增殖的影响,进一步研究hepaCAM对c-Myc的具体调节作用及抑制肾癌增殖的作用机制。方法:MTT检测10058-F4对肾癌增殖作用的时间依赖性和剂量依赖性;FCM检测细胞周期;Western blot检测hepaCAM对c-Myc稳定性、磷酸化及c-Myc下游分子P21和cyclin D1表达的影响。结果:10058-F4可抑制肾癌增殖并阻止细胞周期于G0/G1期,上调hepaCAM表达后,c-Myc的稳定性降低; c-Myc磷酸化增加; c-Myc下游分子cyclin D1表达下调、p21表达上调。结论:C-Myc特异性小分子抑制剂10058-F4可抑制肾癌增殖,其作用与hepaCAM抑制肾癌增殖作用相当,hepaCAM可同时下调c-Myc蛋白水平表达,说明hepaCAM可能通过抑制c-Myc蛋白水平表达从而抑制肾癌增殖,与以上相符的是,hepaCAM可使c-Myc蛋白稳定性降低,促进其泛素化降解,而T58位c-Myc磷酸化是其泛素化降解的前题,上调hepaCAM表达后T58位c-Myc磷酸化增加,说明hepaCAM是通过增加T58位c-Myc磷酸化增加促进其降解,进而调节其相应下游分子cyclin D1、p21等表达抑制肾癌增殖。