洛阳孟津县农民吸烟与DNA损伤相关性分析

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吸烟能引发肺癌、喉癌、咽癌等多种肿瘤。但至今人们对吸烟的致癌机制仍不十分清楚。DNA作为机体的重要遗传物质,其损伤被认为是肿瘤发生的重要机制之一。有研究表明,吸烟产生的烟雾含有大量自由基,自由基可以直接导致DNA损伤,引起DNA断裂,诱发基因突变和细胞癌变。目的该研究选取洛阳孟津县健康男性不吸烟和吸烟人群为研究对象,通过测定有关的吸烟和不吸烟人群外周血淋巴细胞DNA损伤指标和染色体损伤情况,探讨吸烟与DNA损伤的关系,为进一步研究吸烟致癌机制积累资料。方法整群抽样选取来自于洛阳孟津县某被调查自然村的健康男性村民为研究对象。通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测2组研究对象血清可替宁含量、血浆8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-hydroxydeoxygunosine,8-OHdG)含量和血浆中多环芳烃DNA加合物(polycyclic aromatic hydrocarbon-DNA, PAH-DNA)加合物的水平;采用碱性单细胞凝胶电泳试验(single cell gel electrophoresis, SCGE)微量全血法检测2组研究对象DNA单链断裂损伤;采用血淋巴细胞胞质分裂阻断法微核试验(Cytokinesis-block micronucleus assay in human lymphocyte, CBMN)检测2组研究对象外周血淋巴细胞的微核率。同时根据日吸烟量与烟龄分组进行各个指标的比较研究。结果1.一般资料:纳入的研究对象为114例。其中吸烟组67例,平均53.406±7.061岁;不吸烟组47例,平均51.312±10.481岁,2组年龄差异无统计学意义(P>0.05);每个年龄段的吸烟与不吸烟组之间的体质指数(Body Mass Index, BMI)差异均无统计学意义(P>0.05),表明吸烟组与不吸烟组均衡可比。2.可替宁结果:不吸烟组可替宁含量与年龄线性相关性无统计学意义(r=0.183,P=0.218);与不吸烟组(4.661±4±1.802 ng/m1)相比,吸烟组的可替宁含量显著升高(327.011±4±1.293 ng/ml,P<0.05);吸烟组的烟龄与可替宁含量呈直线正相关(r=0.815,P=0.021);与<20支/d吸烟组相比,≥20支/d吸烟组可替宁含量显著升高(P<0.05),说明可替宁含量与每天吸烟支数呈正相关。3.遗传毒性实验结果:采用Pearson相关分析表明不吸烟者彗星尾长、彗星拖尾率与年龄线性相关性无统计学意义(彗星尾长:r=0.279,P=0.089;彗星拖尾率:r=0.268,P=0.093);与不吸烟组(彗星尾长:10.903±1.891μm;彗星拖尾率:18..550±1.471%)相比,吸烟组的彗星尾长(28.161±4.572μm)和彗星拖尾率(34.402±5.491%)显著升高(P<0.05);吸烟组的烟龄与彗星尾长和彗星拖尾率呈直线正相关(彗星尾长:r=0.772,P=0.001;彗星拖尾率:r=0.811,P=0.001);与<20支/d吸烟组相比,≥20支/d吸烟组彗星尾长和彗星拖尾率显著升高(P<0.05),说明彗星尾长和彗星拖尾率与每天吸烟支数呈正相关。人群微核率四分位数范围为5-10%o,中位数8%o。与不吸烟组(中位数5%o,P25=3‰,P75=6‰)相比,吸烟组(中位数10‰,P25=9‰,P75=11‰)的微核率显著增高(W=1128.500,P<0.05);<20支/d和≥20支/d2组的微核率没有差别(W=1204,P=0.491>0.05)。但不同烟龄3组间的微核率差异有统计学意义(卡方统计量为30.701,P<0.05);且随着烟龄的增加,微核率也显著增高(P<0.05)。4.DNA加合物检测结果:不吸烟者8-OHdG和PAH-DNA含量与年龄均线性相关性无统计学意义(8-OHdG:r=0.232, P=0.107; PAH-DNA:r=0.124, P=0.115);与不吸烟组8-OHdG (1.612±0.510)ng/ml; PAH-DNA (63.022±6.360) ng/ml相比,吸烟组的8-OHdG (3.912±0.461) ng/ml和PAH-DNA含量(96.811±4.882)ng/ml显著升高(P<0.05);吸烟组的PAH-DNA与烟龄呈直线正相关(r=0.702,P=0.001),但是8-OHdG与烟龄线性相关性无统计学意义(r=0.204,P=0.097);与<20支/d吸烟组相比,≥20支/d吸烟组8-OHdG和PAH-DNA含量显著升高(P<0.05),说明8-OHdG和PAH-DNA含量与每天吸烟支数呈正相关。结论吸烟可以导致人外周血淋巴细胞的DNA单链断裂和染色体损伤,引起遗传毒性效应;吸烟可以诱发细胞DNA加合物8-OHdG和PAH-DNA的增加,表明吸烟具有DNA损伤效应,是诱发人体遗传物质损伤的重要诱变因素之一。
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