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目的:探讨激活大鼠脑组织原代星形胶质细胞的α7尼古丁乙酰胆碱能受体(nicotinic acetylcholine receptor,nAChR)调控β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)聚集的研究。方法:分离新生大鼠大脑皮质,培养原代星形胶质细胞并纯化、传代,使用细胞免疫荧光的方法鉴定细胞及纯度;体外制备Aβ1-42寡聚体;将培养细胞分为对照组、α7 nAChR激动剂组、α7 nAChR阻断剂组、PI3K/Akt信号通路抑制剂组以及Aβ组、激动剂+Aβ组、阻断剂+Aβ组。激动剂有尼古丁、PNU、s24795,阻断剂为甲基牛扁亭(methyllycaconitine,MLA)、LY294002。用蛋白印迹法(Western blotting)检测星形胶质细胞内源性B-晶状体蛋白(αB-crystallin,Cryab)、磷酸化Akt、Aβ的表达。结果:采用免疫荧光法鉴定所培养的细胞,结果显示星形胶质细胞占所有细胞的95%以上。检测内源性Cryab蛋白表达结果显示:(1)尼古丁组与对照组比较,尼古丁组的内源性Cryab表达明显增高(P<0.05),MLA阻断剂组与尼古丁组比较,阻断剂组的内源性Cryab表达降低(P<0.01),LY294002抑制剂组与尼古丁组比较,抑制剂组的内源性Cryab表达降低(P<0.01);(2)PNU组与对照组比较,PNU组的内源性Cryab的表达增加(P<0.05),MLA阻断剂组与PNU组相比,内源性Cryab表达降低(P<0.01),LY294002抑制剂组与PNU组比较,抑制剂组的内源性Cryab表达降低(P<0.01);(3)s24795组与对照比较,s24795组的内源性Cryab表达明显升高(P<0.01),MLA阻断剂组与s24795组比较,阻断剂组的内源性Cryab表达明显降低(P<0.01),LY294002抑制剂组与s24795组比较,抑制剂组的内源性cryab表达降低(p<0.01)。检测磷酸化akt蛋白的表达结果为:(1)尼古丁组与对照组比较,尼古丁组的磷酸化akt表达明显增高(p<0.05),mla阻断剂组与尼古丁组比较,阻断剂组的磷酸化akt表达降低(p<0.01),ly294002抑制剂组与尼古丁组比较,抑制剂组的磷酸化akt表达降低(p<0.01);(2)pnu组与对照组比较,pnu组的磷酸化akt的表达增加(p<0.05),mla阻断剂组与pnu组相比,磷酸化akt表达降低(p<0.01),ly294002抑制剂组与pnu组比较,抑制剂组的磷酸化akt表达降低(p<0.01);(3)s24795组与对照比较,s24795组的磷酸化akt表达明显升高(p<0.05),mla阻断剂组与s24795组比较,阻断剂组的磷酸化akt表达明显降低(p<0.01),ly294002抑制剂组与s24795组比较,抑制剂组的磷酸化akt表达降低(p<0.01)。检测aβ蛋白的表达结果为:(1)对照组正常的细胞内没有aβ蛋白的表达,尼古丁组与aβ组相比,尼古丁组的aβ蛋白表达均明显降低(p<0.01),ly294002抑制剂组尼古丁组比较,抑制剂组的aβ蛋白的表达均明显升高(p<0.01);(2)对照组正常的细胞内没有aβ蛋白的表达,pnu组与aβ组相比,pnu组的aβ蛋白表达均明显降低(p<0.01),ly294002抑制剂组与pnu组比较,抑制剂组的aβ蛋白的表达均升高(p<0.01);(3)对照组正常的细胞内没有aβ蛋白的表达,细胞总蛋白中,对照组aβ蛋白无表达,s24795组与aβ组相比,s24795组的aβ蛋白表达降低(p<0.05),ly294002抑制剂组与s24795组比较,抑制剂组的aβ蛋白的表达明显升高(p<0.01)。结论:尼古丁、pnu以及s24795通过激活星形胶质细胞α7nachrs上调内源性cryab从而抑制aβ集聚;pi3k/akt信号通路很可能是这3种激动剂通过星形胶质细胞α7nachrs上调内源性cryab从而抑制aβ集聚过程的重要参与因素。为进一步研究cryab蛋白可能是治疗ad的一个潜在靶点提供了一定的基础。