【摘 要】
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益生菌能够调节肠道生态平衡,对宿主产生健康的影响,最受关注的是乳酸菌和双歧杆菌。随着益生菌产业的不断发展,越来越多的益生菌被开发和应用。在益生菌筛选过程中,胆盐耐受
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益生菌能够调节肠道生态平衡,对宿主产生健康的影响,最受关注的是乳酸菌和双歧杆菌。随着益生菌产业的不断发展,越来越多的益生菌被开发和应用。在益生菌筛选过程中,胆盐耐受性是必须考虑的重要因素。菌株只有具备胆盐耐受能力,才能顺利定植于肠道并发挥相应的益生作用。本论文对七株商用乳杆菌进行了生物学性质的研究,结果发现植物乳杆菌Lp-115的生长能力旺盛、能耐受高浓度的胆盐,且具有很强的耐渗能力,较强的抑菌能力和耐胃液能力,因此以该菌为研究重点,进行后续的研究。为了进一步提高植物乳杆菌Lp-115的胆盐耐受性,本论文测试了六种不同的碳水化合物,其中麦芽糊精能够显著提高胆盐耐受能力,其最适添加量为4.0%。此外,从四个方面对胆盐耐受能力增强的机制进行了探究。结果显示,麦芽糊精虽然不能直接促进菌株的生长,但增强了菌体疏水性,改变了菌体细胞膜脂肪酸组成,提高了胆盐水解酶基因(pva3)的转录水平。为了对植物乳杆菌Lp-115的胆盐耐受能力进行深入的研究,本论文在体外构建了胆盐水解酶BSH1,并测定其基本酶学性质。该酶的最适底物是GDCA,最适温度为37 ℃,最适pH范围在5.0~6.0,Mn2+和甘油的添加能提高酶活性,而Cu2+、Co2+和Zn2+具有强烈的抑制作用。此外,本论文测定了该酶的相关动力学参数,对BSH1的性质有了全面的了解。
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