模拟氮沉降对双台河口潮滩湿地沉积物细菌及氨氧化细菌的影响

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:newyidiyu
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目前氮沉降已造成了河口生态系统受损、生态功能降低等严重问题。本试验在双台河口潮滩湿地翅碱蓬生长区进行了为期6个月、共四次不同浓度(尿素)、不同形式(尿素、硫酸铵、硝酸铵)的施氮实验,以此模拟氮沉降,研究双台河口潮滩湿地沉积物微生物生物量、细菌16S rRNA基因拷贝数、细菌群落结构,氨单加氧酶(amoA)基因拷贝数、潜在硝化速率及氨氧化细菌(AOB)群落结构等的动态变化,旨在探索各指标对模拟氮沉降的响应,进而揭示氮沉降对河口生态系统中微生物的影响。通过氯仿熏蒸法测得每次施氮后沉积物中微生物生物量碳(MBC)和生物量氮(MBN),结果表明与未施氮处理的对照组比较,施氮期间0.1和0.2gN/kg干土的尿素可使MBC和MBN极显著提高(p <0.01),0.4、0.8gN/kg干土的尿素使MBC和MBN显著提高(p <0.05)。尿素、硫酸铵和硝酸铵三种形式(0.2gN/kg干土)处理组MBC、MBN显著高于对照组(p <0.05),但三者的影响程度存在一定差异。采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术对每次施氮后沉积物中细菌16S rRNA基因的含量进行了测定,结果表明,与对照组比较,施氮期间0.1、0.2和0.4gN/kg干土的尿素可使细菌16S rRNA基因的含量极显著提高(p <0.01),0.8gN/kg干土的尿素使细菌16SrRNA基因的含量显著提高(p <0.05)。尿素、硫酸铵和硝酸铵三种形式(0.2gN/kg干土)处理组细菌16S rRNA基因的含量极显著高于对照组(p <0.01)。氮的累积施加使沉积物中细菌16S rRNA基因的含量的下降。利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对每次施氮后沉积物的细菌群落结构进行分析,结果表明,与对照组比较,施氮期间不同浓度的尿素对细菌群落结构有一定影响;尿素、硫酸铵和硝酸铵三种形式(0.2gN/kg干土)处理组细菌群落结构无明显差异。施氮期间细菌群落的优势种群均为Proteobacteria。施氮均能增加细菌群落多样性,氮的累积能降低沉积物细菌多样性。三种氮形式对群落多样性的影响略有差异。采用Real-Time PCR技术对每次施氮后沉积物中氨氧化菌功能基因氨单加氧酶(amoA)基因的含量进行了测定,结果表明,施氮期间,与对照组比较,0.2gN/kg干土的尿素可使amoA基因的含量极显著提高(p <0.01),0.4gN/kg干土的尿素使amoA基因的含量显著提高(p <0.05)。尿素、硫酸铵和硝酸铵三种形式(0.2gN/kg干土)对amoA基因的含量影响程度存在明显差异(p <0.05);氮的累积施加使沉积物中氨氧化菌amoA基因的含量下降。通过添加铵盐液体培养测定每次施氮后沉积物的潜在硝化速率,结果表明,与对照组比较,施氮期间0.1、0.2和0.4gN/kg干土的尿素可极显著增加潜在硝化速率(p <0.01),0.8gN/kg干土的尿素施2-4次可显著增加潜在硝化速率(p <0.05);三种氮形式(0.2gN/kg干土)施2-4次沉积物潜在硝化速率极显著高于对照组(p <0.01)。采用DGGE技术对每次施氮后沉积物中AOB群落结构进行分析,结果表明,与对照组比较,施氮期间不同浓度尿素及对尿素、硫酸铵和硝酸铵三种形式对AOB群落结构有一定影响。不同浓度尿素处理组之间及尿素、硫酸铵和硝酸铵三种形式处理组之间AOB群落结构有一定差异。施氮期间AOB的群落优势菌群由Nitrosospira变为Nitrosomonas。施氮处理均能增加AOB群落的多样性,氮的累积施加能提高AOB的群落多样性,三种氮形式对AOB的群落多样性的影响略有不同。
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