Ephrin-B3沉默对大鼠脊髓损伤后功能修复及Gap-43表达的影响

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目的观察Ephrin-B3基因沉默后对脊髓损伤(SCI)功能恢复的影响,为临床相关治疗提供可行的实验依据。方法构建3组针对Ephrin-B3基因的siRNA干扰质粒(用于实验组:A组、B组、C组)及1组乱序siRNA干扰质粒(用于对照组D组),体外克隆并提取质粒后包装慢病毒颗粒。半横切法制作成年大鼠SCI模型,将病毒颗粒注入SCI处。分别在注入1、2、4、8周后,采用BBB评分法比较大鼠肢体功能恢复情况;采用RealTime-PCR法检测伤后各组脊髓组织Ephrin-B3mRNA基因表达情况;采用免疫组化法观察脊髓组织Gap-43的表达变化。结果Ephrin-B3mRNA在正常大鼠脊髓内呈相对低表达,D组可见表达水平呈明显上升趋势,A、B、C3组都出现Ephrin-B3沉默效果,B组尤为明显。转染后1~4周,B组大鼠BBB评分呈持续升高趋势,高于其他3组,D组明显低于实验组,4周时各组恢复效果都进入平台期。免疫组化结果显示,B组脊髓组织内Gap-43表达最明显,从转染后1周趋高,4~8周有所下降,而D组呈持续性弱表达。结论沉默Ephrin-B3能够促进大鼠SCI早期功能修复并上调脊髓组织内Gap-43的表达。
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