【摘 要】
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目的基于量子点标记技术,建立一种快速、便携的适用于现场快速检测布鲁氏菌病抗体的免疫层析法。同时对比其与常规布鲁氏菌病检测方法的优势。方法提取布鲁氏菌全菌蛋白,对其浓度测定后,以全菌蛋白作为标记抗原和包被抗原,利用量子点标记技术、免疫层析技术制备试纸条,同时优化各种反应条件、标记条件,确定其反应温度、保存温度等。用量子点试纸条对不同人、动物血清进行检测,确定其灵敏度、特异度,研究其稳定性。最后用同批
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目的基于量子点标记技术,建立一种快速、便携的适用于现场快速检测布鲁氏菌病抗体的免疫层析法。同时对比其与常规布鲁氏菌病检测方法的优势。方法提取布鲁氏菌全菌蛋白,对其浓度测定后,以全菌蛋白作为标记抗原和包被抗原,利用量子点标记技术、免疫层析技术制备试纸条,同时优化各种反应条件、标记条件,确定其反应温度、保存温度等。用量子点试纸条对不同人、动物血清进行检测,确定其灵敏度、特异度,研究其稳定性。最后用同批血清将量子点试纸条与试管凝集试验、虎红平板凝集试验、胶体金免疫层析试纸条结果进行对比,分析该试纸条的可行性。结果标记的布鲁氏菌全菌蛋白特异性好,无交叉反应。该全菌蛋白标记浓度为3.9mg/ml,包被浓度为2.0mg/ml,最低检测灵敏度的血清效价为1:25。试纸条最佳反应时间在25℃~30℃,常温下储存试纸条稳定性较好,且重复性好,变异系数为4.0%。通过对199例血清检测,该试纸条灵敏度为98.53%,特异度为93.57%,与试管凝集反应的符合率为96.98%,符合程度较好。配对四格表资料的Mc Nemar检验结果显示p>0.05。与胶体金试纸条、虎红平板凝集试验串联或并联使用灵敏度和特异度高于单一方法的使用。结论以布鲁氏菌全菌蛋白作为标记和包被抗原的量子点免疫层析试纸条,通过优化各种条件,与试管凝集试验、胶体金试纸条、虎红平板凝集试验等比较具有一定的优势,可用于对布鲁氏菌病的快速检测和初步筛查。
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