具有抗菌活性海洋共附微生物的筛选及活性产物的研究

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:pomerku
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由于海洋独特的环境,其中微生物及其代谢产物已成为开发新型抗菌、抗病毒、抗肿瘤制剂和制备活菌制剂的重要来源。本研究基于此背景下,主要从海参肠道内筛选出抗菌活性高、抗菌谱广、安全的菌株,同时对抗菌物质的理化性质、产抗菌物质菌株的培养组分进行了研究,研究结果分述如下:1.利用琼脂块法初筛得到抗菌活性的菌株。从135个菌株中筛选得到26株具抗菌活性的菌株,占到筛选总数的19.20%。经过复筛后,最终得到16株具有显著抑菌活性的菌株,其中有6株菌只对弧菌有较强抑制作用,有7株菌只对溶壁有较强抑制作用,有3株菌对弧菌和溶壁均有较强抑制作用。最终选取一株具有广谱抗菌活性的菌株(命名为HS-A38)进行下一步的研究。2.对菌株HS-A38的代谢产物中的活性成分理化性质进行了研究。活性粗提物经过不同的温度、酸碱和有机溶剂的处理,采用牛津杯法测抑菌活性,结果发现:该活性物质耐高温强,经121℃处理仍有活性;该活性物质pH耐受性范围广,在pH 2-12之间仍然具有活性;该活性物质在常见有机溶剂中能保持活性,并且在甲醇中耐受性最佳。3.菌株HS-A38发酵液经过盐酸沉淀,有机溶剂萃取,甲醇溶解后点样于薄层层析板,再经过茚三酮显色,并结合生物自显影技术,发现4种物质:初步推断为直链类的脂肽化合物,并且初步分析得到化合物1和2具有抑制副溶血弧菌的能力。4.优化了菌株HS-A38的培养基组成。通过单因素实验和响应面实验设计得到最佳的培养基组分为:葡萄糖8.49 g/L,豆粕粉12.0g/L,尿素0.625 g/L,酵母膏4.0g/L,K2HPO4 4.0 g/L, ZnSO4 0.053 g/L,优化后的活菌浓度达到1.64×109cfu/mL,与优化前菌体浓度7.22×108相比,提高了2倍多。
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