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目的探讨AQP9基因过表达对顺铂诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法将重组慢病毒LV-AQP9(以LV-GFP作为对照)导入SMMC-7721细胞中,构建SMMC-7721/LV-AQP9重组细胞。激光共聚焦显微镜观察重组慢病毒LV-AQP9在SMMC-7721中的感染效率,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测AQP9在SMMC-7721中表达情况。CCK-8法检测不同浓度顺铂(DDP)处理肝癌SMMC-7721细胞后24h、36h、48h细胞的增殖抑制率并选取最佳顺铂处理浓度和时间。顺铂分别处理转染前后的肝癌SMMC-7721细胞。实验分组:GFP组为空载体慢病毒转染的SMMC-7721细胞;AQP9组为含过表达AQP9基因慢病毒载体转染的SMMC-7721细胞;GFP+DDP组为顺铂处理的空载体慢病毒转染的SMMC-7721细胞;AQP9+DDP组为顺铂处理的含过表达AQP9基因慢病毒载体转染的SMMC-7721细胞。采用AnnexinⅤ/7AAD双标流式细胞术和DAPI染色检测各组细胞的凋亡情况。用蛋白质印迹法检测AQP9,GRP78以及Caspase-12的蛋白表达水平。结果激光共聚焦显微镜观察到重组慢病毒LV-AQP9在SMMC-7721细胞中转染效率达90%以上,且AQP9 mRNA和AQP9蛋白表达水平在SMMC-7721细胞中均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.01)。顺铂作用SMMC-7721细胞24h后的半数抑制率(IC50)为5ug/mL。四组细胞的凋亡率之间都有显著差异,差异有统计学意义(P<0.05)。采用多因素方差分析AQP9和顺铂对人肝癌细胞对凋亡的影响,其结果显示:AQP9过表达明显促进细胞凋亡(FAQP9=71.391.780,P=0.000);DDP显著诱导肝癌细胞凋亡(FCDDP=361.682,P=0.000);AQP9可显著增强顺铂诱导肝癌细胞凋亡,具有协同作用(FAQP9×CDDP=26.681,P=0.001)。AQP9+DDP组细胞GRP78和cleaved Caspase12蛋白表达显著高于GFP组、AQP9组、GFP+DDP组,差异有统计学意义(P值均<0.01),而GFP组和AQP9组间无明显统计学差异。结论AQP9过表达能够增强DDP诱导肝癌SMMC-7721细胞发生凋亡,增强其对化疗的敏感性。其机制可能是AQP9通过内质网应激信号通路细胞凋亡途径,发挥与DDP的协同作用促进凋亡的发生。