目的：血管性痴呆（vascular dementia, VD）是严重危害老年人身心健康的常见疾病，给社会和家庭带来沉重的负担。随着社会人口老龄化，脑血管病的发病率越来越高；其病死率降低，而其造成的各种精神障碍和智能障碍却有增高的趋势。VD的防治日益受到人们的关注。目前VD的发病机制尚不清楚，石杉碱甲（哈伯因）改善智能障碍的药理学机制尚在探讨。海马组织被认为是参与学习与记忆的重要结构。生理状态下，海马神经细胞内的Ca2+作为第二信使参与了长时程增强的形成，而长时程增强是学习和记忆形成的微观形式。脑组织缺血缺氧，影响钙通道、钙泵和钙结合蛋白，海马神经细胞钙超载，导致钙稳态失调。本实验通过建立小鼠VD模型，观察其海马神经细胞内静息态[Ca2+]i及在去极化后[Ca2+]i的动态变化，观察海马神经细胞数目、形态及超微结构改变，探讨VD发病的分子生物学机制及石杉碱甲改善智能、提高VD患者学习与记忆的新药理学机制。方法：本研究共分为三部分。第一部分以昆明小鼠为研究对象，采用双侧的颈总动脉丝线结扎方法、经连续三次反复缺血—再灌注，制备VD小鼠模型，并设立假手术对照组、药物治疗组（石杉碱甲）；造模手术后第29、30天，采用跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠分别进行学习和记忆成绩测试，并观察各组小鼠行为学差异。第二部分以采用冷胰蛋<WP=5>白酶消化法快速分离的小鼠海马神经细胞为研究对象，特异性Ca2+荧光染料Fluo-3/AM作为[Ca2+]i静息状态及动态变化时的显示剂，在激光扫描共聚焦显微镜下观察各组小鼠海马神经细胞静息状态[Ca2+]i有无差异；并且使用高钾（50 μmol/L）溶液使神经细胞去极化，观察300 sec内[Ca2+]i动态变化，并记录[Ca2+]i升高的峰值、幅度、升高至峰值时所用的时间及恢复到静息状态水平所用的时间，经统计学处理且做出[Ca2+]i动态变化的曲线，比较各组小鼠海马神经细胞[Ca2+]i动态变化有无差异。第三部分采用4%多聚甲醛溶液灌注固定小鼠脑组织为研究对象，分别用Nissl染色法和Golgi染色法，在光镜下观察各组小鼠海马组织神经细胞微观变化，对海马CA1区神经细胞计数；并且观察海马CA1区锥体细胞顶树突及其分支和基树突变化，比较各组海马CA1区锥体细胞的差异。并且，在透射电子显微镜下，观察海马CA1区锥体细胞的超微结构变化的差异。结果：⑴ 跳台试验：模型组小鼠学习和记忆成绩显著下降，表现为学习阶段的反应时间延长（P<0.01）、错误次数增加（P<0.01），记忆阶段的潜伏时间缩短（P<0.01）、错误次数增加（P<0.01）；但是，药物治疗组较模型组明显改善（P<0.01），并且与假手术对照组之间没有差别（P>.05）。⑵ 水迷宫试验：模型组小鼠学习和记忆成绩也显著下降，表现为学习阶段的游全程时间延长和错误次数增加（P<0.01），记忆阶段的游全程时间延长和错误次数增加（P<0.01）；但是药物治疗组较模型组明显改善（P<0.01），并且与假手术对照组之间没有差别（P>.05）。⑶ 海马神经细胞静息状态[Ca2+]i：模型组小鼠海马组织神经细胞[Ca2+]i<WP=6>显著增高（P<0.01），而药物治疗组较模型组明显降低（P<0.01），并且与假手术对照组之间没有差别（P>.05）。⑷ 海马神经细胞[Ca2+]i动态变化：在去极化时，与假手术对照组比较，模型组小鼠海马神经细胞[Ca2+]i上升幅度降低（P<0.01），而恢复至静息状态所用的时间明显延长（P<0.01）；但是，升高至峰值所用的时间及峰值与假手术对照组之间无明显变化（P>0.05）。而药物治疗组较模型组上升幅度增高（P<0.01）、恢复至静息状态所用的时间缩短（P<0.01），并且与假手术对照组之间无差异（P>.05）。⑸ 海马CA1区锥体细胞的微观变化：在光镜下，与假手术对照组比较，模型组海马组织CA1区锥体细胞数目明显减少（P<0.01），其顶树突总长度明显缩短（P<0.05）；但是，药物治疗组较模型组海马组织CA1区锥体细胞数目增多（P<0.01）、顶树突总长度也延长（P<0.05），并且与假手术对照组之间无显著性差异（P>.05）。⑹ 海马组织CA1区锥体细胞超微结构变化：模型组海马组织锥体细胞内高尔基体及内质网均重度损伤，核内染色质凝固，细胞核周围内质网损伤明显，核周体胞质膨胀；药物治疗组海马组织神经细胞损伤比模型组明显减轻。⑺ 各组小鼠海马神经细胞的静息状态[Ca2+]i及其动态变化、微观变化及超微结构变化，均与各组小鼠学习和记忆成绩差异相一致；各组小鼠海马神经细胞的微观变化及超微结构变化与其静息状态的[Ca2+]i及其动态变化相一致。结论：本实验成功地建立了小鼠VD模型，经过跳台试验、水迷宫试验证实了VD小鼠存在学习和记忆能力障碍，能够模拟临床上VD的智能障碍，是比较理想的VD动物模<WP=7>型；同时，也取得了石杉碱甲的临床治疗效果。在激光共聚焦显微镜下，证实了海马神经细胞内静息状态[Ca2+]i过高、去极化时[Ca2+]i升高幅度降低及恢复至静息状态所用的时间延长均参与了VD智能障碍的发病；石杉碱甲可以通过抑制VD小鼠海马神经细胞内静息状态[Ca2+]i升高、改善去极化时[Ca2+]i的动态变化，而改善钙稳态，进而减轻临床症状。在光镜、透射电镜下，证实了海马组织CA1区锥体细胞的数目减少、顶树突?