巨大口蘑六种菌株贮藏期间褐变及相关机理的比较研究

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食用菌子实体在采后贮藏期间生命活动仍在继续,贮藏时间的增加会引起其生理生化和自身品质的变化,不同菌株子实体在贮藏期间会表现出不同的贮藏特性。巨大口蘑是一种珍稀食药用菌,其SCAU1菌株在8~12℃条件下能贮藏30 d不变色,有着独特的不易褐变性质。本研究以巨大口蘑SCAU1、SCAU3、SCAU4、H49、H99和H100六种菌株子实体为实验材料,比对分析六种菌株子实体采后贮藏期间的褐变度及相关生理指标的变化情况,并结合SCAU1菌株的A6单核菌丝基因组数据和高通量二代转录组测序技术,对六种巨大口蘑菌株进行有参转录组测序及分析,旨在筛选出耐贮藏的巨大口蘑菌株品种,并从分子水平探讨巨大口蘑不同菌株褐变度差异的内在可能原因,具体结果如下:1.在相同贮藏条件下定期测定六种菌株子实体的褐变及褐变相关生理指标(PPO、酪氨酸酶、漆酶和总酚含量)的变化情况并对各指标与褐变度的相关性进行分析。结果表明:贮藏期间六种巨大口蘑的褐变度呈上升趋势,PPO和漆酶活性均呈折线波动下降趋势,H49和SCAU3菌株的TYR活性先上升再下降,另外4个菌株的TYR活性先下降后上升再折线波动下降,其中SCAU1、H49和H100三种菌株的褐变度和PPO、TYR及漆酶活性较低,SCAU3菌株褐变度和PPO活性最高,而总酚含量在六种菌株间并未出现显著差异(p>0.05);相关性分析显示,六种菌株的褐变度均与PPO活性呈显著负相关(p<0.05),此外,仅SCAU3菌株的褐变度还与TYR活性呈显著负相关(p<0.05);2.在相同贮藏条件下定期取样测定巨大口蘑六种菌株的抗氧化酶(CAT、POD和SOD)活力,结果表明:巨大口蘑六种菌株子实体的CAT呈缓慢下降趋势,在整个贮藏期间差异不显著(p>0.05);POD活性在前6 d内均急剧下降,随后呈不同幅度的缓慢上升再下降的变化趋势;六种菌株的SOD活性在贮藏前期12 d内均急剧上升,随后呈不同速率的下降;3.对巨大口蘑六种菌株转录组数据进行质量评估、组间关系分析和,结果表明:巨大口蘑六种菌株的转录组测序质量较好,能有效保证测序数据可以用作后续生物信息学的分析;在六种菌株的基因表达水平组间比较中,SCAU1、SCAU4、H99和H100四个菌株聚为一类,SCAU3和H49菌株各自单独为一类;4.对巨大口蘑不同菌株组间比对的差异表达基因进行分析,挑选组间差异分析中有代表性的SCAU1、SCAU3、H49和H100四种菌株进行组间比对及GO功能注释和KEGG代谢通路富集分析。结果表明:四种菌株差异表达基因的功能注释主要是在代谢过程、细胞组分、细胞过程和催化活性中;5.对巨大口蘑六种菌株在黑色素物质生成相关代谢通路富集到的差异表达基因及其表达模式进行分析,结果表明:在不同菌株的两两组间比对中,差异表达基因都主要富集在苯丙氨酸代谢和酪氨酸代谢途径;六种菌株在苯丙氨酸代谢中相关基因的表达量呈显著差异,六种菌株的酪氨酸代谢主要以氧化分解途径为主,在酪氨酸代谢的黑色素生成途径相关基因中,SCAU3菌株的表达量最高,SCAU1菌株的表达量最低。从上述实验结果中可看出,在巨大口蘑六种菌株中,SCAU1和H49两菌株表现出较好的贮藏品质和市场价值,SCAU3菌株的贮藏品质最不理想。从转录组水平的分析结果来看,SCAU1和H49菌株不易褐变可能与其子实体细胞的代谢过程和黑色素生成途径的基因差异表达有关。
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