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目的:癌相关成纤维细胞（carcinoma-associated-fibroblasts，CAFs）是一种近来被广泛关注的基质细胞。作为肿瘤基质的最主要成分，它通过不断地向其所处外界环境分泌大量细胞因子等物质，直接或间接作用于其周围的肿瘤细胞。这不仅促进肿瘤细胞的不断增殖，而且加速肿瘤细胞的浸润与转移。有证据显示，癌相关成纤维细胞通过高程度自噬行为降解自身大分子并分泌养分于外界环境中，为其所处微环境中的癌细胞提供营养。白细胞介素13(Interlukine13，IL-13)是Th2细胞分泌的多效能细胞因子，它在乳腺肿瘤与乳腺炎都有异常高的表达。近期研究显示，IL-13参与调控成纤维细胞亚型细胞的NF-κB(nuclear transcription factorκB)，通路的上游信号，而NF-κB则是参与细胞自噬调控过程的重要信号分子。本研究通过将人乳腺成纤维细胞与人乳腺癌细胞共培养模拟肿瘤微环境，力图探索IL-13在肿瘤微环境中对人乳腺成纤维细胞的增殖和自噬基因表达的影响。 方法:1.细胞培养:细胞生长在含10％胎牛血清、105U/L青霉素和105U/L链霉素的DMEM培养液中，放入37℃、5％CO2、100％相对湿度的培养箱培养。2.实验分组:实验分为4组，空白组（单独培养人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst）;IL-13组（单独培养人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst并加入终浓度20ng/mL IL-13）;共培养组又称435组（人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst与人乳腺癌细胞株MDA-MB-435共培养）;共刺激组（人乳成纤维细胞株Hs578Bst与人乳腺癌细胞株MDA-MB-435悬挂共培养并加入终浓度20ng/mL IL-13）。3.台盼蓝染色:台盼蓝染色检测各组Hs578Bst细胞的活性。4.CCK-8法:将105/mL的Hs578Bst细胞接入6孔板，参照分组分别加入终浓度20ng/mL IL-13，或以4∶1的比例将Hs578Bst细胞与MDA-MB-435细胞共培养。培养72h后，CCK-8法测定各组Hs578Bst细胞的增殖。5.免疫细胞化学法:各组细胞培养72h后，免疫细胞化学方法检测Hs578Bst细胞自噬分子Beclin1及LC3Ⅱ的蛋白表达，IPP6软件测各组两种自噬相关蛋白的平均光密度。6.实时定量荧光PCR:各组细胞培养72h后，用实时定量荧光PCR检测Hs578Bst细胞自噬分子Beclin1和LC3Ⅱ的mRNA的表达。 结果:1.细胞活性实验结果显示，IL-13对Hs578Bst细胞的活细胞百分率无显著影响。2.细胞增殖实验结果显示，435组分别与空白组或IL-13组比较，435组细胞数量增加(P＜0.05);共刺激组分别与空白组或IL-13组比较，共刺激组细胞数量增加(P＜0.05);空白组与IL-13组之间无显著差异(P＞0.05);435组与共刺激组之间无显著差异(P＞0.05)。3.免疫组织化学实验结果显示，共刺激组分别与各组比较，Hs578Bst细胞的Beclin1和LC3Ⅱ蛋白表达均显著上调(P＜0.05);435组Hs578Bst细胞Beclin1和LC3Ⅱ蛋白均表达上调，分别与空白组或IL-13组比较，差异有显著性(P＜0.05)。IL-13组与空白组比较，Hs578Bst细胞的Beclin1和LC3Ⅱ蛋白表达均无显著性差异(P＞0.05)。4.实时定量荧光PCR结果显示，共刺激组分别与各组比较，Hs578Bst细胞的Beclin1与LC3Ⅱ的mRNA表达均显著上调(P＜0.05)，435组Hs578Bst细胞的Beclin1与LC3Ⅱ的mRNA表达上调，分别与空白组或IL-13组比较，差异有显著性(P＜0.05)。IL-13组与空白组比较，Hs578Bst细胞Beclin1和LC3Ⅱ mRNA表达均无显著性差异（P＞0.05）。 结论:1.人乳腺癌细胞株MDA-MB-435与人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst共培养能促进Hs578Bst细胞的增殖。2.IL-13对人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst的增殖无显著影响。3.IL-13与人乳腺癌细胞株MDA-MB-435具有协同作用，上调人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst的自噬基因Beclin1和LC3Ⅱ mRNA和蛋白的表达。4.IL-13单独作用对人乳腺成纤维细胞株Hs578Bst的自噬基因Beclin1和LC3ⅡmRNA和蛋白的表达无显著影响。