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乐果是广泛使用的有机磷农药之一,作为高效杀虫剂大量用于农业生产来防治病虫害,然而它毒性高、难降解,大量频繁的使用使环境与农产品受到污染。如何降低和消除乐果及其它有机磷农药的毒害,成为人们亟待解决的问题。微生物降解具有费用省、环境影响小、可最大限度降低污染物浓度等优点成为降解有机磷农药的重要途径。本研究从长年施用乐果的土壤中分离筛选出来一批微生物,其中细菌菌株共200多株,真菌共100多株。通过进一步的筛选优化,获得3株能在高浓度乐果中生长的真菌,分别编号为L1,L2,L3。采用气象色谱法测定上述菌株的降解活性,结果显示该三株菌都有一定的降解活性。其中,120h内L1共降解乐果230mg/L,L2共降解乐果245mg/L,L3共降解乐果280mg/L。对菌株L3进行深入研究。通过形态观察,初步确定该菌株是曲霉,再采用ITS (internal transcribed spacer)菌种鉴定方法,设计引物18SF : 5’-TCCGTAGGTGAACCTGCG-3’; 28SR : 5’-TATCCCTACCTGATCCGAG-3’。PCR扩增产物克隆测序后登陆GenBank+EMBL+DDBJ+PDB数据库检索,初步鉴定菌株属于Aspergillus nomius的一个菌株。该菌株以共代谢方式降解乐果的,能耐受浓度达6,000mg/L的乐果农药,其最适生长温度为28℃,最适pH值为7.0左右,在pH6.0-9.0和温度25-40℃均能良好生长,表明该菌株具有较强的环境适应能力。L3在培养基摇瓶培养中可降解辛硫磷877 mg/L·5d,乙酰甲胺磷461 mg/L·5d,降解率达95.3%和65.9%,初步确定菌株L3具有广谱的降解有机磷农药的能力。田间小区试验表明,液体菌剂在田间试验中仍有一定的降解效果,在土壤中有明显的有机磷农药降解效果(13.0mg/Kg·7d),对番茄果实的效果不明显(仅0.16mg/Kg·7d)可能是由于菌剂没有固定化。初步确定菌株L3所产生的有机磷农药降解酶属于胞内酶,经过硫酸铵初步纯化,测定该酶粗提液的最适反应温度为40℃左右,最适反应pH值为7.0左右,Mg2+、Zn2+、Mn2+和Ca2+对该酶的酶活影响不是很大;Fe3+、Hg2+和IAA对该酶有强烈的抑制作用;EDTA、SDS对该酶有微弱的激活作用;Triton X-100、Cu2+对酶活有明显的激活作用。动物实验表明,菌株L3对小白鼠有一定的毒性,其分生孢子对小白鼠产生急性毒性,不产生亚急性毒性,孢子能在腹腔中寄生并且能从腹腔中进入脏器中,孢子对小白鼠眼及皮肤伤口不存在感染性。