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一、聚乙烯亚胺包被的四氧化三铁磁性纳米颗粒对SHI-1细胞生物学特性的影响目的初步探讨聚乙烯亚胺包被的四氧化三铁(PEI-Fe3O4)磁性纳米颗粒对白血病细胞株SHI-1的生物学特性的影响,探究磁共振细胞影像技术跟踪细胞生物学行为的可行性。方法(1)、以人急性单核细胞白血病细胞株SHI-1为对象,用透射电镜观察PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒能否被细胞内吞;(2)、用电感耦合等离子发射光谱仪及普鲁士蓝染色观察细胞纳米颗粒载量的影响因素;(3)、用CCK-8法检测PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒对SHI-1细胞增殖的影响;用流式细胞术(FCM)检测PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒对细胞分化、凋亡的影响;以甲基纤维素半固体培养基培养法检测PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒对细胞集落形成能力的影响;(4)、以transwell跨膜实验检测PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒对SHI-1细胞侵袭能力的影响;以荧光实时定量PCR检测PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒对SHI-1细胞MMP-2、MMP-9、CD44、CXCR4、TIMP-1、TIMP-2mRNA表达水平的影响;以未经PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒处理的SHI-1细胞作为对照组。结果(1)、PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒能成功被SHI-1细胞内吞;(2)、细胞内磁性纳米颗粒载量与其起始浓度及与细胞共培养的时间呈正相关,随细胞分裂传代而减少。(3)、以5100μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理细胞,60100μg Fe/ml组对细胞的抑制率高于550μg Fe/ml组,差异具有统计学意义(P <0.05);30μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理SHI-1后,和对照组相比,在TPA诱导分化前后的CD11b和CD14表达差异无统计学意义,(P>0.05);以0、20、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理24h后的SHI-1细胞的集落形成率,在各组间差异没有统计学意义(P>0.05);(4)、以050μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理SHI-1细胞24h,细胞凋亡率随PEI-Fe3O4浓度的增加而增高(P <0.05),实验组SHI-1细胞侵袭能力较对照组显著下降(P <0.05),测量标记细胞的MMP-2、MMP-9、CD44、CXCR4、TIMP-1、TIMP-2mRNA表达水平发现TIMP-2表达下调,MMP-9表达上调。结论(1)、PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒可高效率标记SHI-1细胞;(2)、在550μg Fe/ml范围内,对SHI-1细胞的增殖、集落形成能力、分化没有显著影响;(3)、25和50μg Fe/ml浓度的PEI-Fe3O4磁性纳米颗粒对SHI-1细胞MMP-2、CD44、CXCR4、TIMP-1mRNA表达水平无影响,但使TIMP-2表达下调,MMP-9表达上调。二、聚乙烯亚胺包被的四氧化三铁磁性纳米颗粒标记的SHI-1细胞在裸鼠的MR成像目的白血病细胞的髓外浸润常常成为白血病化疗或移植后复发的根源,若能及时发现白血病细胞的转移和浸润机理,对于白血病髓外浸润病灶的临床诊断和治疗都将有重大意义。本文旨在通过应用磁性纳米颗粒PEI-Fe3O4标记的SHI-1细胞在裸鼠皮下成瘤并以MR检测瘤体内SHI-1细胞的信号,为在活体内探究白血病,尤其是中枢神经系统白血病的转移和浸润的病理生理机制奠定基础。方法对20只4至6周龄的Babl/c裸鼠以环磷酰胺腹腔注射,随机分为4组,每组5只裸鼠,将经0、25、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理24h的SHI-1细胞1×107个分别注射于裸鼠的左前肢皮下,空白对照组在相同部位注射等体积的PBS,记录各组别瘤体生长速度,应用MR成像技术检测瘤体信号强度,R T-P C R检测皮下瘤体内SHI-1细胞的MLL/AF6基因表达。结果经0、25、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理后SHI-1细胞的皮下成瘤率为100%,未经标记的SHI-1组比较,25、50μg Fe/ml PEI-Fe3O4处理组的皮下瘤生长速度无明显差异,MR检测瘤体信号随PEI-Fe3O4浓度的增加而降低,随肿瘤的生长而增高(P<0.05)。各组别瘤体内均可检测到SHI-1细胞的MLL/AF6基因表达。结论经PEI-Fe3O4标记的SHI-1细胞在体内具有增殖能力,可被MR成像技术检测。