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目的白内障是致盲率很高的疾病,现普遍认为各种原因导致的晶状体上皮细胞(LEC)氧化损伤及凋亡是白内障发生的主要机制。国外学者的研究证明H2O2可通过PI3K/AKT信号通路诱导人晶状体上皮细胞(HLEC)凋亡;我们的前期实验已证明芸香苷(Ru)对H2O2诱导人晶状体上皮细胞凋亡有抑制作用。但对其抑制作用机理的研究却很少。故基于以上依据为核心,我们本课题研究PI3K/AKT信号通路是否与Ru抑制H2O2诱导人晶状体上皮细胞凋亡的机制有关。方法(1)将正常的SRA01/04系HLEC复苏后培养,接种于两块96孔板,其中一块板加入200μmol/L H2O2培养不同时间;另一块板加入100μmol/LRu预处理不同时间后再加入200μmol/L H2O2培育24 h,MTT法测两板各组中细胞存活率。(2)实验细胞分为对照组、H2O2组、芸香苷组及LY294002组,使用western blot法测p-AKT及AKT的相对表达量,为了验证芸香苷抑制H2O2诱导的HLEC凋亡与PI3K/AKT信号通路的关系。(3)按上述分组,使用流式细胞学(flow cytometry,FCM)方法测各组的细胞凋亡率。结果(1)H2O2诱导HLEC的凋亡,且随着时间的延长,细胞生存率逐渐下降;数值在24 h时最接近细胞生存半数抑制率(IC50),因此选择24 h为H2O2处理细胞的时间。(2)Ru保护HLEC免受H2O2诱导的凋亡,且在预处理1 h时为最高。1 h后,细胞的生存率随着Ru预处理时间的延长而逐渐下降。因此选择1 h为芸香苷预处理的最佳时间。(3)在对照组、H2O2组、芸香苷组及LY294002组中,H2O2组的细胞凋亡率最高;芸香苷组较H2O2组低(P<0.01);LY294002组较芸香苷组高,但与H2O2组差异无统计学意义(P>0.05)。(4)在对照组、H2O2组、芸香苷组及LY294002组中,H2O2组及LY294002组的p-AKT相对表达量下降(P<0.01 vs control group),芸香苷组p-AKT的相对表达量升高;结论Ru可以抑制H2O2诱导的HLEC凋亡,其保护机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。