结缔组织生长因子促进半月板无血管区损伤愈合

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:cslxml
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目的:探讨结缔组织生长因子(CTGF)对纤维软骨细胞外基质分泌、VEGF表达与促进半月板无血管区损伤修复中的作用,为临床应用提供理论基础和实验依据。方法:将新西兰大白兔半月板白区,经胶原酶消化、离心分离后,提取半月板纤维软骨细胞,培养至第2代。用流式细胞仪鉴定该细胞表面CD44,CD45和CD105标志物,并用Ⅱ型胶原抗体做免疫细胞化学鉴定,以证明所培养、传代的细胞是纤维软骨细胞。分别将细胞在浓度为100ng/m的CTGF培养基中培养3天和14天后,通过实时定量聚合酶链反应,检测Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原和VEGF基因的表达变化情况。将45只大白兔随机分为3组,在兔半月板无血管区,制作长3mm的纵形撕裂。处理方式为:单纯半月板缝合术、缝合术+填充PBS-纤维蛋白胶,缝合术+填充1.5ugCTGF-纤维蛋白胶。术后第1周、4周、10周,用荧光免疫组织化学分析法,显示Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原和WEGF在损伤处的表达与分布情况,直观撕裂处的愈合情况。结果:体外实验第14天,定量RT-PCR结果显示,100ng/mCTGF组中的Ⅰ型胶原,Ⅱ型胶原和VEGF mRNA表达比PBS对照组,分别增加了2.38+0.63倍,2.96+0.87倍,2.14±0.56倍(统计学均有显著性差异)。体内试验的荧光免疫组织化学结果显示,在术后第10周,CTGF治疗组中的Ⅰ型胶原,Ⅱ型胶原和VEGF已完全填充撕裂损伤处。PBS-蛋白胶组中,损伤处仍有明显裂隙。结论:CTGF可促进半月板无血管区细胞外基质(Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原)的合成;损伤处VEGF的表达活性明显增强,有利于促进无血管区半月板撕裂损伤的愈合。
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