目的:本研究建立基于代谢组学和网络药理学分析的方法,对松萝酸干预后A549细胞的内源性代谢物进行分析,并阐释相关的代谢通路,探索松萝酸抑制NSCLC的作用机制。方法:在本研究中,首先用不同浓度的松萝酸处理A549细胞,确定80%存活率时的药物浓度用于进一步研究。然后利用该浓度松萝酸干预A549细胞24 h,得到分析样本。该样本使用UHPLC-Q-TOF-MS/MS平台联合DDA和DIA技术进行数据采集。得到的数据采用软件Progenesis QI中的数据挖掘工具进行处理,并利用t检验和OPLS-DA方法进行统计分析,得到P值和VIP值。同时满足P<0.05和VIP>1的代谢物被视为差异代谢物。通过HMDB数据库匹配鉴定后得到潜在的生物标志物。最后利用在线平台Metabo Analyst 4.0和KEGG在线数据库分别进行通路富集分析和筛选。另外,采用网络药理学方法,利用多个数据库分别寻找到松萝酸及NSCLC核心靶点,并对其进行蛋白互作的网络构建,使用Metascape数据库对核心靶点进行通路分析,采用Cytoscape 3.7.1软件构建松萝酸治疗NSCLC的“成分-核心靶点-通路”网络模型,并对可能受到影响的相关通路进行了分析。结果:实验表明A549细胞在50μg/m L的松萝酸处理下,存活率达到80%。以该浓度处理下的细胞提取液,进样液质联用仪,数据经多元统计分析和在线数据库匹配鉴定,共筛选鉴定出了47个潜在的生物标志物,所涉及到的代谢通路主要包括能量代谢、氨基酸代谢和脂质代谢。采用网络药理学方法,筛选出了松萝酸可作用于NSCLC的核心靶点基因,涉及主要相关通路20条。代谢组学与网络药理学两种方法在作用机制方面的研究各有侧重又可互为补充,因此可对松萝酸治疗NSCLC时在分子水平和通路水平受到的影响深入研究。结论:本研究首次建立了基于代谢组学和网络药理学分析的综合方法,利用A549细胞模型,探索松萝酸在治疗NSCLC方面的可能机制。最终经松萝酸处理后的A549细胞与对照组细胞相比较,共筛选出47种差异代谢物,涉及谷胱甘肽代谢、氨基酸代谢、甘油磷脂代谢等代谢途径。因此,代谢组学和网络药理学相结合的策略有助于更加全面的解释松萝酸对NSCLC治疗的可能机制。该方法为药物作用机制的研究与阐释提供了新的思路。