半乳糖受体介导c-myc反义核酸对肝癌细胞的靶向增效作用

被引量 : 0次 | 上传用户:dexiaolu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 探讨半乳糖(galactose, Gal)受体介导的c-myc反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide, ASODN)对肝癌细胞的靶向投递作用和对肝癌细胞增殖的高效抑制作用。 方法 1 细胞培养:人肝癌Bel-7402细胞,Raji淋巴瘤细胞,U937淋巴瘤细胞;培养体系:RPMI-1640培养液含10%新生牛血清,100u/mL青霉素、100μg/mL链霉素,置37℃、5%CO2培养箱培养。 2 反义核酸的合成、Gal-PEI-ASODN复合物的制备、离体靶向投递实验: (1) c-myc ASODN的合成:针对c-myc基因序列162~179设计ASODN并进行全程硫代修饰,3′端羧基荧光素FAM修饰或不修饰(上海生物工程公司合成),序列为:5′-CTT CTC GAG GCA GGA GGG-3′。 (2) 半乳糖-聚乙烯亚胺(polyethyleneimine, PEI)-c-myc反义核酸复合物(Gal-PEI-ASODN复合物)制备:采用无血清RPMI-1640液分别溶解Gal-PEI试剂和c-myc ASODN, 2:1(v/v)混匀,使两者氮磷比为5.0,得Gal-PEI-ASODN复合物。 (3) 离体靶向投递实验:取Bel-7402细胞、U937细胞或Raji细胞,加入荧光标记的ASODN、Gal-PEI-ASODN,孵育不同时间,流式细胞仪检测细胞荧光摄取率及胞内平均荧光强度的差异,相差/荧光显微镜观察荧光标记物进入3种细胞的形态,台盼蓝拒染法检测Gal-PEI-ASODN复合物对3种细胞增殖抑制作用的差异。 3 台盼蓝拒染法、细胞克隆和流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和坏死: 取Bel-7402细胞,加入不同浓度的Gal-PEI试剂,ASODN,Gal-PEI-ASODN,孵育不同时间,台盼蓝拒染法检测药物对细胞增殖的抑制作用,计算药物对细胞增殖的
其他文献
探讨利用高斯正算公式进行汽车跑偏量测试的计算方法,该方法计算出的汽车跑偏量与方位角法计算出的跑偏量具有较好的一致性,并可以方便地做出行驶轨迹图,值得在试验测试中推
根据我国隧道建设的发展状况对市政长隧道供配电方案进行比较研究,分析市政长隧道供配电不同方案的可靠性与经济性,并对供配电系统方案设计中的设计原则、用电负荷性质分类等
2018年,我国宏观经济运行总体平稳,稳中有进,但也面临许多新的挑战。2018年,我国总体价格水平处于合理区间变化,基本实现了政府价格水平调控目标。其中,推动物价水平上涨的主要原因
自我效能感是班杜拉1977年提出的概念,它是指人们对自己实现特定领域行为目标所需能力的信心或信念。职业生涯规划起始于20世纪60年代,并于90年代中期从欧美国家传入中国,它
新媒体业务平台下网络广播以其自身的优势正在对以往传统媒体广播的模式形成迅猛的冲击。面对网络媒体迅猛的发展,网络广播的特点与优势决定了其今后的发展道路。以网络广播的
采用自编问卷考察《心理统计学》考试成绩影响因素的结构、特点及影响途径。结果发现,影响考试成绩的个体内部因素是学习态度、学习信心、学习方法,外部因素是课堂教学质量、
明代中后期,士人普遍热衷于游历,王士性也不例外,他借做官的便利条件,游遍了当时全国两京十二省(除福建省外),相继写出了《五岳游草》、《广游志》、《广志绎》等地理论著。
在狭义的"听觉文化"的界定基础之上,我们还应充分考虑基于"媒介形态变化"的媒介文化史的维度。"口传文化"以人类语言的存在方式为基础,而语音是听觉对象中最有文化意义的形式
现阶段国家大兴土木,桥梁建设正在蓬勃发展,薄壁箱型截面在各种类型的桥梁中广泛应用。随着计算机软硬件技术的高速发展,桥梁结构的计算分析需考虑和能考虑的因素也越来越多,为使
介绍烟气排放连续监测系统(CEMS)在催化裂化装置烟气脱硫单元运行过程中出现的典型故障现象,给出了相关故障现象的情况说明、原因分析和处理措施。