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目的:观察shRNA抑制Twist基因表达后对结肠癌LoVo细胞生物学行为的影响,并探讨Twist与结直肠癌生长转移的关系。方法:采用半定量RT-PCR法和Western blot法从mRNA和蛋白水平分别检测Twist在LoVo、SW620细胞(高转移潜能结肠癌细胞系)以及SW480、SW1116细胞(低转移潜能结肠癌细胞系)中的表达。再以Twist相对高表达的LoVo细胞为研究对象,在脂质体Lipofectamin2000TM介导下转入shRNA-Twist重组质粒,转染后48h荧光显微镜下观测转染效率。经G418筛选出稳定转染的阳性细胞后,设立空白对照组(LoVo细胞(只加入脂质体))和阴性对照组(LoVo-shRNA-NC细胞) ,通过Western blot法检测阳性组(LoVo-shRNA-Twist细胞)中Twist蛋白的受抑效果。分别应用MTT法和FACS检测以上三组细胞的增殖和凋亡情况,以及分别采用划痕实验和Transwell小室侵袭实验测定该三组细胞的迁移和侵袭能力。结果:半定量RT-PCR法和Western blot法结果显示,Twist在LoVo、SW620细胞中的mRNA和蛋白水平都显著高于SW480、SW1116细胞(P<0.05)。shRNA-Twist重组质粒转染LoVo细胞后48h,荧光显微镜下观测转染效率在70%以上;经G418(筛选浓度为500μg/ml)筛选出稳定转染的阳性细胞后,Western blot法检测示,阳性组细胞中Twist蛋白水平较空白对照组和阴性对照组明显降低(P<0.05),抑制率约为73%,可用于后续实验。应用MTT法检测细胞增殖、FACS检测细胞凋亡结果示,阳性组细胞增殖能力及凋亡率与两个对照组比较无明显差异(P>0.05),采用划痕实验检测细胞体外迁移能力、侵袭实验检测细胞体外侵袭能力结果示,阳性组细胞体外迁移及侵袭力均较两个对照组显著减弱(P<0.05)。以上所有实验,两个对照组之间比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:Twist表达下调减弱了结肠癌LoVo细胞的体外侵袭转移能力,但对LoVo细胞的生长无明显影响,Twist有望成为结直肠癌中抗肿瘤转移治疗的新靶标。