蛹虫草继代培养中表型多样性与产量的关系研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:myplucky
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本研究采用10株蛹虫草组织分离株在PDA培养基上进行15次继代培养获得不同表型的菌落,通过对不同表型菌落生长速度的测定、产量的测定,无性型产孢结构的观察、同工酶酶谱的研究,来探讨继代培养中菌落表型变化与子实体产量的关系。旨在为蛹虫草生产提供理论和实践依据。主要结果如下: (1)在继代培养中,蛹虫草菌落可产生角变现象,将角变区菌丝分离培养,依据菌落有无角变、菌落颜色、菌丝气生性等性状,可将继代培养分离的菌落分为5种类型。5种菌落类型在15代继代培养中的分布规律是,Ⅰ、Ⅱ型菌落在继代培养1-15代都可出现,但角变频率高、角变面积大的角变菌落主要分布在继代培养的3-7代。Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型分布在继代的最前和最后几代。不同类型菌落的子实体产量不同,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型菌落可形成子实体,其中Ⅰ型菌落子实体产量最高。Ⅱ、Ⅲ型次之。Ⅳ和Ⅴ型无子实体形成能力。角变频率和角变面积与子实体形成的关系是,角变频率和角变面积较大的菌株子实体形成能力强。出发菌株的菌落形态不同,出发菌株子实体产量亦有区别。菌落黄色、菌丝气生性中等的菌落易形成子实体。菌落白色或黄色、菌丝气性强的菌落不能形成子实体。出发菌株菌落形态决定角变类型及分布。菌落形态为白色菌丝强气生出发菌株,在继代培养的前几代以Ⅱ型角变类型为主;而菌落形态为黄色菌丝气生性中的出发菌株,在继代培养的前几代以Ⅰ型角变类型为主。 (2)通过对出发菌株的生长速度测定表明,生长速度快的菌株产量较高。菌丝的生长速度与菌丝气生性有一定关系,但与菌落的颜色无关。不同类型菌落中,Ⅳ型生长速度最快。菌丝生长速度与子实体产量没有明显关系。不同类型菌落菌丝干重测定结果表明,Ⅳ、Ⅴ型菌落菌丝干重较高,而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型菌落菌丝干重较低。 (3)对出发菌株和继代分离株的无性型产孢结构观察表明,出发菌株的无性型具有多型性,其无性产孢结构主要为拟青霉型(Paecilomyces-type)、头孢霉型(Verticillium-type)两种。在同一虫草菌株中均具有两种无性产孢结构,不同菌株间虫草无性产孢结构差异不是很大;不同类型菌落的菌株间无性型无明显差异;不同世代菌株间无性型差异主要表现为分生孢子数量的差异;子实体产量不同的菌株中,无性型差异表现在两种产孢结构数量比的差异。子实体产量较高的菌株两种无性型比例相近,无子实体产量形成的菌株两种无性型的比例相差较大。 (4)对出发菌株和继代分离菌株酯酶同工酶酶谱研究表明,酯酶同工酶酶谱可以反映出不同菌株间的差异,但对同一菌株的不同类型菌落间差异反映更为明显。不同菌株间谱带的迁移率存在差别,不同菌株间谱带的深浅不同,T12菌株各类型的菌株的谱带都较深,而T10各菌株谱带相对均较浅。不同类型菌株间谱带差异在谱带数量与颜色深浅两个方面均有差别。菌落形态相似,但产量有差异的菌株间谱带的差异不是很大,只表现出谱带颜色深浅上的差异,如T10的有产量菌株与无产量菌株只在第1条酶带的深浅上表现出差异。
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