本论文的主要内容是将DNA循环放大技术、杂交链式反应技术、比色分析技术、化学发光分析技术与表面增强拉曼检测技术相结合,研制出高选择性、高灵敏度的传感分析方法,对DNA以及生物分子的检测提供了基础性研究资料。本文重点介绍了三种传感分析方法的构建、性质以及其相关应用的研究：1.本试验研究了一种新型的基于酶循环放大和杂交链式反应检测DNA的方法。首先,由于结合了循环放大技术以及杂交链式反应技术双重放大,使得这种定量检测目标DNA的方法具有较高的灵敏度和较快的检测速度,检测限可达1.0x10-16M；其次,引用了磁性纳米微球,有效的降低了背景信号值。最后,反应体系加入标记了亲和素的辣根过氧化物酶(HRP),通过亲和素与生物素之间的特异性结合,使得它可以跟含有生物素的DNA链结合并形成OPDA-H2O2-HRP体系,最终用紫外分光光度计检测产生的信号。由于所测DNA的含量跟OPDA-H2O2-HRP体系显色程度有关,并在一定范围内成比例关系,因此可定量的检测溶液中DNA含量。2.在结合前期酶循环放大的工作基础上,创建了一种基于邻近连接放大技术(PDCA)的高度灵敏性和选择性的化学发光检测可卡因的方法。其主要的工作原理描述如下：首先,创建了两条新型的可卡因适体探针,探针分别由三部分组成,包括可卡因适体序列、剪切酶特异性识别序列以及与外加DNA发卡结构杂交序列。在可卡因以及外加发卡DNA存在的条件下,这两条探针可以与之形成特定的复合体结构,当内切酶与聚合酶加入时,邻近连接放大反应被激活,为了更好的降低检测限,对上述生成的信号DNA又进行了一次酶循环放大。最终,反应体系加入标记了亲和素的辣根过氧化物酶(HRP),使得它可以跟含有生物素的DNA链结合并形成Luminol-H2O2-HRP体系,通过luminol-H2O2-HRP流动注射化学发光检测化学发光信号并分析可卡因的量,灵敏度可达到1.0×10-9M。3.在以上化学发光可卡因适体传感器的研究基础上,引入了表面增强拉曼技术(SERS),创建了一种新型的基于表面增强拉曼检测可卡因的方法。该体系不仅应用了双重酶循环放大技术,同时还构建了拉曼分子修饰的金胶条码,对于表面增强拉曼技术应用的同时也扩展了对可卡因适体传感器的研究。本实验可检测到5.0×1-10M的可卡因试样溶液,在对实际血清样品的回收检测试验中得到了很好的效果。