肾病综合征外周血单个核细胞凋亡与P-糖蛋白170表达

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目的:1、检测原发性肾病综合征(PNS)患儿不同时间点外周血单个核细胞(PBMC)细胞凋亡、P-糖蛋白170(P-gp170)的表达情况。2、分析细胞凋亡与P-gp170表达的关系,探讨其在糖皮质激素(GC)耐药中的可能机制及临床意义。方法:1、选取28例PNS患儿,依据口服强的松4周时尿蛋白的情况分为激素敏感组(SSNS组,16例)、激素耐药组(SRNS组,12例),另设10例健康体检儿童作为对照组。2、对所有儿童分别于两个时间点采取外周血标本:(1)强的松治疗前;(2)强的松治疗4周时,采用密度梯度离心法进行PBMC提取。3、通过AnnexinV-PI双染色,使用流式细胞仪(FCM)检测不同时间点PBMC细胞凋亡率4、通过P-gp170单克隆抗体,使用流式细胞仪(FCM)检测不同时间点PBMC细胞P-gp170表达情况。5、对PBMC细胞凋亡率及P-gp170表达进行相关性分析。结果:1、PBMC细胞凋亡率检测GC治疗前PBMC在SSNS组、SRNS组及对照组均有凋亡,凋亡率分别为(6.14±1.85)%、(6.44±1.83)%和(5.56±1.53)%,3组间差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,治疗4周后SSNS组凋亡率增高为(11.48±6.25)%(P<0.01),SRNS组无明显变化[(6.94±1.87)%,P>0.05]。2、PBMC膜表面P-gp170表达GC治疗前P-gp170在SSNS组、SRNS组、对照组表达率分别为(4.54±3.10)%、(11.78±4.52)%和(2.30±2.07)%,3组间差异有统计学意义(P<0.01),SRNS组高于其他2组,SSNS组高于对照组;治疗后P-gp170在SSNS组、SRNS组的表达率较治疗前增高为(7.29±2.69)%、(15.36±4.36)%,差异有统计学意义(P均<0.01),且SRNS组高于SSNS组(P<0.01)3、PBMC P-gp170与细胞凋亡的相关性PBMC细胞凋亡与P-gp170表达未见线性相关(r=-0.174,P>0.05)结论:1、健康儿童和PNS患儿PBMC均有P-gp170的表达,且PNS患儿P-gp170表达高于健康儿童。2、外周血P-gp170表达增高可能与PNS患儿GC耐药有关。3、PBMC的凋亡延迟可能参与PNS患儿GC耐药。4、PBMC细胞凋亡率及P-gp170可作为判断PNS患儿预后的指标。
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