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目的:检测TRPM7在治疗性浅低温(34℃)处理的大鼠离体心肌缺血再灌注模型中的作用,并探讨在治疗性浅低温(34℃)中TRPM7与PI3K通路的关系。方法:SPF清洁级健康成年雄性SD大鼠(250-350g)108只(湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供),将其随机分为6组(n=18):对照组(SHAM),心肌缺血再灌注组(I/R),心肌缺血再灌注+TRPM7抑制剂2-APB组(I/R+2-APB),34℃浅低温缺血再灌注组(34H+I/R),34℃浅低温缺血再灌注+PI3K抑制剂wortmannin组(34H+I/R+WORT),34℃浅低温缺血再灌注组+TRPM7抑制剂2-APB(2-Aminoethoxydiphenyl borate,2-APB)组(34H+I/R+2-APB)。SHAM组:正常大鼠组,不做任何处理。I/R组:37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30min,缺血30min,37℃灌注液再灌注120min;I/R+2-APB组:37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30min,缺血30min,灌注液中加入TRPM7抑制剂2-APB后行37℃灌注液再灌注120min;34H+I/R组:37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30min,缺血30min,34℃灌注液再灌注120min;34H+I/R+WORT组:37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30min,缺血30min,在灌注液中加入PI3K抑制剂wortmannin后行34℃灌注液再灌注120min;34H+I/R+2-APB组:37℃灌流液平衡灌流大鼠心脏30min,缺血30min,在灌注液中加入TRPM7抑制剂2-APB后行34℃灌注液再灌注120min;以压力换能器连接Medlab生物信号采集系统记录平衡灌流30 min末(T0,基础值),再灌注30 min(T1),60 min(T2),90 min(T3),120 min(T4)各时间点的心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压上升/下降最大速率(±dp/dt max)。在再灌注120min末,取心脏进行免疫组化观察TRPM7蛋白变化、western blot测定TRPM7蛋白含量,HE染色观察心肌损伤,并测定TTC染色后的心肌梗死面积。结果:1、常温下心肌缺血再灌注损伤后TRPM7的表达水平变化(1)在I/R组中,TRPM7的表达量升高,与SHAM组有显著性差异(P<0.05);所形成的心肌梗死面积与SHAM组比较明显增多(52.74±1.25%vs.13.87±1.17%,P<0.05);(2)在I/R+2-APB组中,与I/R组比较,TRPM7表达量明显减少(P<0.05);所形成的心肌梗死面积(42.85±1.19%)与I/R组比较明显减少(P<0.05);2、治疗性浅低温(34℃)在心肌缺血再灌注中对TRPM7的影响及其与PI3K通路的关系(1)在34H+I/R组中,缺血再灌注损伤所造成的TRPM7高表达被逆转,其TRPM7的表达量与I/R组相比明显减少(P<0.05);所形成的心肌梗死面积与I/R组相比明显减少(34.63±0.72%vs.52.74±1.25%,P<0.05);(2)在34H+I/R+WORT组中,治疗性浅低温(34℃)所导致的TRPM7表达降低作用被逆转,其TRPM7表达量与34H+I/R组相比增多(P<0.05);治疗性浅低温(34℃)所导致的心肌梗死面积减少作用被逆转,其心肌梗死面积与34H+I/R组相比有所增加(34.63±0.72%vs.48.89±0.52%,P<0.05);(3)在34H+I/R+2-APB组中,其TRPM7表达量与34H+I/R组和34H+I/R+WORT组相比,TRPM7表达量减少(P<0.05);所形成的心肌梗死面积(29.75±0.55%)与34H+I/R和34H+I/R+WORT组相比减少(P<0.05)。3、各组之间血流动力学变化差异没有统计学意义(P>0.05)。结论:1、在大鼠离体心肌缺血再灌注模型中,心肌缺血再灌注损伤时TRPM7蛋白呈现高表达。2、在大鼠离体心肌缺血再灌注模型中,治疗性浅低温(34℃)可以抑制心肌缺血再灌注中TRPM7的高表达,并且这种保护作用是通过PI3K通路介导产生的。