【摘 要】
:
T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)是生物体内必需的酶之一,在核酸的磷酸化反应、基因表达、核酸新陈代谢及DNA损伤修复中具有基础的调节功能。然而,T4 PNK活性与磷酸化过程的异常表达会导致人类多种疾病。因此,构建T4 PNK活性检测的方法对预测与诊断相关疾病是极其重要的。近几年,电化学生物传感器由于响应快、灵敏度高、易小型化、操作步骤少、投入成本低等优势,成为研究的热点领域并受到广大研究者的关注。
论文部分内容阅读
T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)是生物体内必需的酶之一,在核酸的磷酸化反应、基因表达、核酸新陈代谢及DNA损伤修复中具有基础的调节功能。然而,T4 PNK活性与磷酸化过程的异常表达会导致人类多种疾病。因此,构建T4 PNK活性检测的方法对预测与诊断相关疾病是极其重要的。近几年,电化学生物传感器由于响应快、灵敏度高、易小型化、操作步骤少、投入成本低等优势,成为研究的热点领域并受到广大研究者的关注。另外,磷酸盐柱[5]芳烃(PP5)作为第五代超分子主体中的一种,不仅在对客体进行分子识别时具有独特的性质,而且易功能化纳米材料,这为发展新的电化学生物传感器提供了新思路。而且,到目前为止,关于基于磷酸盐柱[5]芳烃构建电化学生物传感器的报道比较少。因此,本文在查阅大量相关文献的基础上,结合磷酸盐柱[5]芳烃对宿主的识别来放大电化学信号,构建新型的电化学生物传感器用来高灵敏检测T4 PNK。主要研究内容包括以下三个部分:1.基于磷酸盐柱[5]芳烃和亚甲基蓝主客识别作用构建T4 PNK电化学生物传感器通过磷酸盐柱[5]芳烃的主客识别能力来增强信号的放大,发展了一种用于T4 PNK的定量检测与抑制剂分析的电化学生物传感器。存在目标物T4 PNK和ATP时,通过催化ATP的γ-磷酸基团转移到自组装在金电极表面的单链DNA 5’-OH端,进而发生磷酸化反应。由于Ti O2纳米粒子与磷酸基团的多配位相互作用,Ti O2纳米粒子能同时连接磷酸化后的DNA和富含负电荷的磷酸盐柱[5]芳烃,最终使得PP5有效组装到电极表面。通过磷酸盐柱[5]芳烃对客体分子亚甲基蓝(MB)优异的识别作用,MB可以在电极表面被大量捕获,显著地产生电流信号,实现对T4 PNK的活性分析。在最佳的实验条件下,该传感器对T4 PNK检测的线性范围为0.0002至5 U/m L,检出限到达0.0001 U/m L。同时,该传感器可应用于T4 PNK抑制剂筛选与实际样品He La细胞中T4 PNK的定量分析。研究结果表明,设计的传感器有望应用于临床诊断、药物筛选等方面,为激酶活性的测定研究提供了新思路。2.基于磷酸盐柱[5]芳烃和多壁碳纳米管复合材料构建T4 PNK电化学生物传感器利用磷酸盐柱[5]芳烃和多壁碳纳米管复合材料(PP5@MWCNTs)来放大电化学信号,构建了一种灵敏、简单、响应快速的电化学生物传感器用于T4 PNK检测与抑制剂分析。基于PP5优异的主客识别能力和MWCNTs良好的导电性能、表面积大的特点,以琉堇(Thi)为电活性客体分子,实现对T4 PNK活性的高灵敏检测。当存在目标物T4 PNK时,固定在金电极表面的底物链被磷酸化,通过Ti O2纳米粒子对磷酸基团之间的介导作用,PP5@MWCNTs组装到电极表面。Thi通过强静电相互作用和电荷转移相互作用能进入PP5的空腔,形成稳定的主客体络合物,促进了Thi的负载效率,从而放大电流响应信号。传感器响应电流与目标物T4 PNK浓度在0.00001 U/m L至15 U/m L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.00001 U/m L。制备的传感器具有良好的重复性和特异性,可用于T4 PNK抑制剂及实际样品He La细胞中T4 PNK活性分析,表明该传感器在早期疾病的诊断、生物分析等方面的巨大潜力。3.基于磷酸盐柱[5]芳烃@钯纳米粒子@还原氧化石墨烯纳米复合材料构建T4 PNK电化学生物传感器基于PP5对甲苯胺蓝(TB)的主客识别作用和PP5@Pd@RGO纳米复合材料构建了一种灵敏、简单的T4 PNK检测及抑制剂分析的电化学生物传感器。DNA链在目标物T4 PNK和ATP同时存在时,发生磷酸化反应,并通过Zr4+发生多配位相互作用后,PP5@Pd@RGO纳米复合材料修饰到电极表面。TB通过强静电相互作用和电荷转移相互作用进入PP5@Pd@RGO纳米复合材料的空腔内,形成稳定的主客体络合物,从而增大了TB的负载量,有效地放大电化学信号。在最佳实验条件下,该传感器对T4 PNK线性响应范围为0.000001 U/m L至1 U/m L,检出限为5×10-7 U/m L。该电化学生物传感器对T4 PNK抑制剂及实际样品分析表明其在早期疾病的诊断、新药研究、癌症的治疗等方面有巨大潜力。
其他文献
致使范畴是人类最基本的认知范畴,每种语言中都有表达致使范畴的手段。泰语属于汉藏语系壮侗语族壮傣语支,主要使用语序和虚词表达语法意义,致使结构以带致使标记的分析型致使为主,兼有词汇型致使,还有少量的形态型致使。本文主要从共时和历时两方面入手,既对泰语致使结构的结构形式、语义机制、致使与被动、受益的关系进行了深度分析;又从类型学的视角,将泰语致使结构与亲属语言、与周边的大陆东南亚语言以及OV型语言景颇
短小灵活、平实质朴的笔法与独特的生活和精神体验相契合,使得笔记成为宋人独特的写作方式。周煇的“清波二志”便是典型,书中所述多为履历见闻或生平与父兄师友相谈之事,一语一笑,可见前辈风流;一言一事,可补正史之亡,裨掌故之缺。除绪论和结语外,本文共分为四章,前三章为重点论述部分。第一章,先对周煇的生平和家族关系进行考证梳理,尽可能地厘清周煇的社会关系。其次对“清波二志”的版本流传情况及其特点进行说明。第
后滑音是侗台语中很特殊的音类。侗台语后滑音专题的研究,对于侗台语古音的重建和韵母系统的演化规律的探讨具有重要的意义和价值,但目前缺乏深入的个案研究。本文以同应壮语作为个案考察,在田野调查的基础上,运用描写语言学、历史比较语言学和实验语音学等方法,对同应话的音系面貌进行详细的描写,进而对同应后滑音进行深入考察,探究其共时特征、对应、来源与演化。发现:1.后滑音在壮族地区的分布。除了广西大新后益乡,其
并列结构是最常见,运用最广泛的结构组合形式之一,从目前并列结构类型学的研究上看,暂无学者将泰语作为考察对象进行分析;从泰语语法研究上看,泰语并列结构的研究成果较少,缺乏系统、细致的考察,基于此,本文从功能语言学、语言类型学、认知语言学等多方面,对泰语并列结构的结构类型、标记类型及模式、标记的显隐规律以及并列项的排序问题进行研究,旨在为泰语并列结构研究做出较为系统的分析。第一章,文章考察了泰语并列结
<正>大雪(2021年12月7日)大雪既是二十四节气中的第二十一个节气,也是冬季的第三个节气。大雪节气较小雪节气而言,气温更低,降雪量更大了。降雪有利于农业生产,但较大范围的降雪也有可能给人们的出行带来不便,如造成航班延误、高速公路封闭等。
<正>作为中华民族独有的智慧和经验,二十四节气不仅是大自然的“节奏”,还是传统文化发展的优秀成果,蕴含着丰富的教育价值与教育资源。一、综合多个领域,挖掘节气文化2016年,二十四节气正式被联合国教科文组织列为非物质文化遗产,其蕴含的文化博大精深,源远流长。教师应深入挖掘节气文化中丰富的天文、地理、
<正>日光潋滟,料峭春风吹开了新年的门扉。自古,季节交替,我们的心情便会跟着变化,或许这就是为什么我们把二十四节气称为中国人骨子里的浪漫吧!春天脚步将至,新年才刚刚开始,今天我们就来穿越时间,一起在文字中读出二十四节气的迷人之处吧!
语言磨蚀是指双语或多语使用者由于某种语言使用的减少或停止,其运用该语言的能力会随着时间的推移而逐渐减退的一种语言现象。目前国外在语言磨蚀研究领域已经取得大量的成果,国内以英语作为外语的语言磨蚀研究也初见成效,但以汉语作为外语的语言磨蚀研究还相对较少,仅探讨了汉语名词、动词和形容词的词汇磨蚀现象。对于汉语学习者在母语环境中,停止汉语学习或降低与汉语的接触频率以后,汉语名量词是否会出现词汇磨蚀的现象还
氧化锆(Zr O2)材料在升温或降温过程中易发生晶型的转变,这种马氏体相变的同时也存在着体积的变化,易导致材料出现破坏性的开裂,加之纯氧化锆的各项性能系数无法满足大型及异形产品的制造指标,极大程度上局限了氧化锆的发展和应用。可见对纯氧化锆的稳定化处理是进一步拓展氧化锆在新兴材料领域的应用的重要手段。微波热处理作为一项清洁节能技术,备受关注,其特别的选择性及整体性加热的特点,高效低耗的优点,是广被用
新时代旅游业发展欣欣向荣,形成了中国旅游行业大繁荣大发展的景象,成为推动当地经济社会发展的动力之源和重要载体。经过四十多年的改革和发展,云南旅游行业成绩斐然,已然成为云南省支柱产业。但是近年来,云南省接连发生欺客宰客、强迫购物、欺行霸市等涉旅典型案件,旅游投诉居高不下,各类旅游乱象层出不穷,受到社会各界的广泛批评与指责,甚至引发大量饱受诟病的旅游危机事件。为坚决遏制旅游乱象,守护云南旅游“金字招牌