背景与目的流行病学调查显示，宫颈癌发病率有上升趋势，严重威胁着女性的生命，位居女性恶性肿瘤死因之首。宫颈癌最主要的转移途径是淋巴转移，而肿瘤的侵润与远处转移是恶性肿瘤治疗成功的主要障碍，淋巴转移是目前明确的导致临床治疗失败和死亡的重要原因。肿瘤的浸润转移能力由肿瘤细胞的多种生物学行为决定，其中肿瘤细胞对其周围基质蛋白的降解能力是一个重要方面，乙酰肝素酶（heparanase，HPA）是一种葡萄糖醛酸内切酶，它能在数个位点降解硫酸乙酰肝素，破坏细胞外基质(extracellular matrix，ECM)和基膜(basement membrane，BM)的完整性，促进肿瘤的局部侵袭和远处转移。我们的前期研究及一些国外的研究已证实HPA在宫颈癌原发灶中的表达显著增高，是宫颈癌的重要生物标志物。细胞角蛋白19（Cytokeratin19，CK19）为细胞角蛋白家族中分子量最小的成员，是构成鳞状上皮细胞骨架的重要蛋白质之一，表达范围严格，特异表达于女性生殖道上皮，已成为上皮性肿瘤细胞较为敏感和特异的标志。国内外都在寻找宫颈癌转移淋巴结特异性和敏感性的生物分子指标，如能在术前准确的预测淋巴结的转移情况，即可准确的了解肿瘤的范围，选择合适的治疗方案，但目前对于淋巴结转移的诊断，尚缺乏有效的手段。基于HPA与宫颈癌以及与淋巴结转移的关系，本研究通过免疫组织化学法检测宫颈鳞癌原发灶及转移淋巴结中HPA的表达情况，首次分析了宫颈鳞癌淋巴结HPA的表达与临床预后因素间的关系，以期为宫颈鳞癌淋巴结的转移诊断提供一新的分子指标。材料与方法收集郑州大学第二附属医院病理科2007年1月-2012年12月确诊的、临床资料完整的宫颈鳞癌石蜡标本102例，其中术后常规病理诊断为淋巴结转移者53例（A组）、淋巴结未转移者49例（B组）。A组选取原发灶、转移淋巴结及未转移淋巴结3个部位，B组选取原发灶和淋巴结2个部位，用于免疫组织化学染色。免疫组织化学S-P法分别检测A、B两组所选部位组织中的HPA表达情况，同时行常规HE染色，HPA阳性的淋巴结行CK19染色，以证实其为转移的宫颈癌病灶。图像分析技术记录各组中HPA表达的平均灰度值，计算出阳性单位。采用SPSS17.0统计软件进行分析，图像分析数据采用x±s表示，各组间比较采用方差分析；HPA表达率采用卡方检验；生存曲线采用Kaplan-Meier方法；生存率比较采用Log-rank检验；多因素分析采用Cox回归分析法。检验水平α=0.05。结果1.术后常规病理诊断淋巴结转移组（A组）中HPA的表达情况：A组原发灶和转移淋巴结中HPA呈阳性表达均为48例，阳性率为90.6%，术后常规病理诊断未转移淋巴结HPA呈阳性表达7例（13.2%）；原发灶、转移淋巴结与未转移淋巴结中HPA平均灰度值逐渐增高，而阳性单位逐渐降低，组内比较，差异均有统计学意义（F灰度值=30.521，P灰度值=0.000；F阳性单位=6.351，P阳性单位=0.021）；2.术后常规病理诊断无淋巴结转移组（B组）中HPA的表达情况：B组原发灶HPA呈阳性表达40例（81.6%），术后常规病理诊断未转移淋巴结HPA呈阳性表达5例（10.2%）；B组原发灶HPA平均灰度值明显低于淋巴结（F=21.397，P=0.000），原发灶HPA阳性单位明显高于淋巴结（F=4.827，P=0.037）。3.宫颈鳞癌中HPA的表达与宫颈鳞癌临床病理特征的关系：淋巴结HPA的表达率与宫颈鳞癌分期（P=0.013）、分化程度（P=0.000）、淋巴结转移（P=0.000）均密切相关。4.宫颈鳞癌中HPA的表达与生存时间的关系：Kaplan-Meier生存分析显示，所有患者的中位生存时间（MOS，median overall survival）为（49.0±5.9）个月，淋巴结转移者MOS为36.0个月，明显低于淋巴结未转移者的58.5个月（P=0.023）；淋巴结HPA阳性表达者MOS为38.5个月，淋巴结HPA阴性MOS为57.0个月，二者比较差异有统计学意义（P=0.040）。Cox模型多因素分析显示淋巴结转移、HPA表达是影响宫颈癌患者预后的独立危险因素（P <0.05）。结论1. HPA在宫颈鳞癌原发灶和转移淋巴结中的表达均显著增高，淋巴结转移是宫颈癌的独立预后因素，可作为宫颈鳞癌淋巴结转移的生物学检测指标；2.宫颈鳞癌淋巴结转移者MOS明显低于淋巴结未转移者，淋巴结HPA阳性表达者MOS明显低于淋巴结HPA阴性表达者，提示淋巴结HPA阳性患者预后差。