补益阳明津气方药对初老雌性大鼠卵巢机能影响的实验研究

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目的:经实验研究探讨“补益阳明津气”方药益胃汤对初老雌性大鼠卵巢机能影响的作用机理,与前期研究相结合以共同佐证中医传统经典理论“五七,阳明脉衰”在绝经前期生殖轴机能衰老中的意义和作用。为延缓绝经前期卵巢机能衰老,促进绝经前期妇女健康,防治相关病症,提供一种新的研究与论治思路。方法:4月龄~6月龄SD雌性大鼠为正常对照组;10月龄~12月龄,阴道细胞学表现动情期延长的SD雌性大鼠作为初老模型大鼠。模型动物随机分为:(1)益胃汤高剂量组、(2)益胃汤中剂量组、(3)益胃汤低剂量组、(4)六味地黄丸组、(5)己烯雌酚组、(6)模型对照组。各给药组灌胃4周后,断头处死,取子宫和卵巢称重,用于子宫和卵巢系数的检测,其中左侧卵巢组织采用免疫组化法检测ER、FSHR表达;右侧卵巢组织用于检测细胞凋亡指标Bcl-2 mRNA、Bax mRNA、Fas mRNA、FasL mRNA、Caspase3 mRNA的表达;部分卵巢组织用电镜观察其组织学变化和超微结构。结果:与模型对照组比较,生殖内分泌机能调控方面:“补益阳明津气”方药益胃汤能增加大鼠子宫指数、卵巢指数,使卵巢ER、FSHR表达上调。细胞凋亡的研究方面:益胃汤可使卵巢Bcl-2 mRNA表达增强,Bax mRNA表达减弱,Fas mRNA、FasL mRNA、Caspase3 mRNA表达下调,抑制卵巢细胞凋亡,但未能恢复至正常对照组水平;电镜观察益胃汤可丰富卵巢颗粒细胞内线粒体和滑面内质网,胞质内有大量脂滴,凋亡小体少见。与模型对照组比较,己烯雌酚组和六味地黄丸组能促进卵泡生长,正向调节卵巢的ER和FSHR表达。与益胃汤相比较本实验研究结果显示:己烯雌酚组对ER、FSHR上调作用不及益胃汤高剂量组;六味地黄丸上调ER、FSHR的作用与益胃汤中剂量无明显差异,但高于益胃汤低剂量组。与模型对照组比较,己烯雌酚组和六味地黄丸在一定程度上抑制卵巢细胞的凋亡。与益胃汤相比较,己烯雌酚组Bcl-2 mRNA表达低于益胃汤高剂量组,FasmRNA、FasL mRNA、Caspase3 mRNA高于益胃汤高剂量组,Bax mRNA表达两组无显著差异。六味地黄丸组Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达与益胃汤中、低剂量组无明显差异,Fas mRNA、FasL mRNA表达高于益胃汤中剂量组,与低剂量组无明显差异,Caspase3 mRNA水平低于益胃汤低剂量组,与中剂量组无明显差异。结论:实验研究提示益胃汤具有类雌激素样作用,促进卵泡生长,改善初老雌性大鼠卵巢的激素内环境,并能抑制卵巢细胞凋亡等作用。这些作用可能是其延缓卵巢机能衰老的机理。
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