金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的一种主要传染性病原菌。本实验运用了分子克隆技术及蛋白表达技术,成功的表达了金黄色葡萄球菌纤维素结合蛋白A(FnBPA)D区的蛋白并对其免疫学活性进行了研究。本研究根据GenBank上公布的金黄色葡萄球菌FnBPA D区的序列,设计了特异性引物,提取分离自内蒙古地区的金黄色葡萄球菌基因11型和基因3型的基因组DNA后进行PCR,并与T载体连接进行克隆。克隆产物经核酸序列测定后表明已成功克隆了目的基因。测序后分别与金黄色色葡萄球菌NCTC 8325株的FnBPA进行比对发现,基因11型和基因3型与其核苷酸同源性分别为95%和94%。基因3型与基因11型之间核苷酸的同源性为96.5%。用DNAstar对测序片段进行抗原位点分析,结果显示,基因11型要比基因3型和标准菌株多一个抗原位点,由此决定表达基因11型的FnBPA D区蛋白。将目的片段与表达载体pET-32(a)连接,连接产物转化宿主菌BL21(DE3)后,用IPTG进行诱导,确定最佳诱导时间,大量表达并纯化出了目的蛋白。表达产物经两次免疫实验动物后,获得较高效价的抗体。用自制血清进行吞噬调理试验,抗金黄色葡萄球菌黏附等一系列试验,证明抗体对金黄色葡萄球菌具有吞噬调理作用,也有抗金黄色葡萄球菌黏附的作用,这将为制备奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌黏附素疫苗奠定基础。