血小板和T细胞活化抗原1（platelet and T cell activation antigen 1,PTA1）最早在1985年由Burns等发现，主要表达于活化T细胞、巨核及血小板谱系，参与T细胞的活化与分化及血小板的活化和聚集。1997年，本室与澳大利亚Newcastle大学合作，从TPA活化的Jurkat细胞cDNA文库中克隆了PTA1基因，证实了PTA1分子是一种新的分化抗原，属于免疫球蛋白超家族成员，胞膜外区仅有2个V样结构域。同年，我室又成功克隆了长臂猿和恒河猴PTA1基因。人、猿和猴PTA1分子cDNA及蛋白水平同源性为93％～95％，表明PTA1在进化过程中高度保守。在2000年第七届国际人类白细胞分化抗原会议上被正式命名为CD226。 NK细胞是先天免疫系统中一类重要的淋巴细胞，具有天然细胞毒作用，并可产生多种细胞因子，参与机体抗感染、抗肿瘤免疫和免疫调节。对于其受体的研究一直是免疫学研究的热点。现已明确，NK细胞识别和清除的是一类丢失或下调MHCⅠ类分子的靶细胞。NK细胞受体主要包括刺激性受体、抑制性受体和不影响NK细胞杀伤功能的受体，并通过重导向杀伤系统鉴定了许多新的刺激性受体或抑制性受体。新近，我们发现PTA1在NK细胞和某些NK细胞系上有较高水平的表达。因此，研究PTA1分子在NK细胞上的功能有十分重要的意义。 第四军医大学硕士学位论文 中文摘要 首先，我们采用兔疫磁珠分离的方法分离得到NK细胞．建立了以免 疫磁珠分离得到的 NK细胞为克隆化对象，用有限稀释法进行克隆化，获 得NK细胞克隆的方法．结果证明这种方法能够稳定获得NK细胞克隆，应 用流式细胞仪检测获得的一株NK细胞克隆表型为 CD56“CD3－。研究了 PTA分子在活化 NK细胞、各科 NK细胞系和 NK细胞克隆上的表达。发 现活It NK细胞上 PTAI表达率在 60OFll。NKL上 PTAI 的表达率为 979％，而 NK92、NK3二和 YT则不表达PTAI。所得到的一株NK细胞克 隆上，PTAI的表达率为61．20。 然后，我ffl压用重导向杀伤系统（redirected cytotoxlclty assay，RCA八 分别以人混合淋巴细胞反应中活化的 NK细胞和 NK细胞克隆为效应细胞， 发现 PTA mAb可明显上调效应细胞杀伤靶细胞 PSIS 的水平。同时用 ELISA的方法检测在杀伤过程中不同时间点杀伤上清中IFN—Y、GM—CSF 和TN F一O的水平，结果发现PTAlhab能明显上调NK细胞在杀伤过程中 分。k IFN一丫和 GM—CSF的水平；动态研究结果表明，以上细胞因子的水平 在 0～4 h上升最快，8～12h趋于平台。而 CD16 mAb可同时上调以上三种 细胞因子的水平。值的注意的是，GM—CSF的水平在0－4h期间 PTAI InAb 组的水平高于 CD16 mAb组，而在随后的时间里 CD16 mAb组又超过了 ＊TA lin＊b组，说明二者活化＊K细胞以及杀伤靶细胞的机制可能有所不同。 以上研究结果表明，PTAI（CD226）是一种新的 NK细胞刺激性膜受体。