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CYD1是课题组前期自主研发、设计并合成的双HDAC和mTOR抑制剂,前期研究结果表明,其具有较好的抗肿瘤活性。胡椒碱是课题组前期从胡椒科植物胡椒（Piper nigrum L.）的干燥成熟果实中提取、分离、纯化获得的吡咯烷类酰胺生物碱。本研究将CYD1和小分子单体化合物胡椒碱作为候选药物,进行了临床前药代动力学研究。研究内容包括三个方面:1、CYD1与胡椒碱体外代谢稳定性和代谢表型研究;2、CYD1与胡椒碱在SD大鼠体内生物利用度研究;3、CYD1在SD大鼠体内代谢产物及代谢途径的研究。主要内容总结如下:1.抗肿瘤化合物CYD1与胡椒碱体外代谢研究采用UFLC-MS/MS技术,建立了适合同时测定体外肝微粒体孵育体系中CYD1与胡椒碱的方法。该方法选择性好,灵敏度和准确度高,精密度好,残留无影响,无基质影响,稳定性良好。1.1抗肿瘤化合物CYD1体外代谢研究（1）对CYD1在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性进行研究,结果表明CYD1在SD大鼠、昆明种小鼠、人、恒河猴和比格犬肝微粒体酶中的体外代谢半衰期分别为110.00、33.32、52.50、83.49和77.87 min。由此推测CYD1在人和昆明种小鼠、恒河猴、比格犬肝微粒体中代谢较接近,在SD大鼠体内代谢较慢;表明CYD1在人、SD大鼠、昆明种小鼠、恒河猴和比格犬肝微粒体中代谢存在种属差异。在后续进行体内实验动物的选择时,可以考虑采用与人代谢较为接近的昆明种小鼠、恒河猴和比格犬作为参考。（2）本实验采用选择性化学抑制剂法。通过对CYD1代谢表型进行研究,结果表明对于CYD1来说,其没有特定的代谢表型,不容易因为特异性代谢产生不良影响。1.2胡椒碱体外代谢研究（1）对胡椒碱在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性进行研究,结果表明胡椒碱在SD大鼠、昆明种小鼠、人、恒河猴和比格犬肝微粒体酶中的体外代谢半衰期分别为48.46、138.60、31.36、147.45和165.00 min。推测胡椒碱在人和大鼠肝微粒体中代谢较接近,代谢相对较快;在昆明种小鼠、恒河猴和比格犬肝微粒体中代谢速率接近,均较慢;表明胡椒碱在人、SD大鼠、昆明种小鼠、恒河猴和比格犬肝微粒体中代谢速率存在明显的种属差异。在后续进行体内实验动物的选择时,可以考虑采用与人代谢较为接近的SD大鼠作为参考。（2）采用选择性化学抑制剂法,对胡椒碱代谢表型进行研究。结果表明人肝微粒体中参与胡椒碱代谢的酶主要有CYP3A4和CYP2C9。代谢表型的研究可以预测其潜在的药物-药物相互作用。提示胡椒碱在与其他药物联用时,需考虑经CYP3A4和CYP2C9代谢的药物之间的相互作用。2.抗肿瘤化合物CYD1与胡椒碱生物利用度研究采用UFLC-MS/MS技术,建立了适合同时测定体血浆样品中CYD1与胡椒碱的方法,该方法选择性好,灵敏度和准确度高,精密度好,残留无影响,无基质影响,稳定性良好。2.1 CYD1生物利用度研究CYD1生物利用度极低,静脉给药后体内半衰期极短(T1/2=0.23h),体内滞留时间(MRT（0-t）=0.28 h)亦短,表明CYD1在体内进行迅速消除。2.2胡椒碱生物利用度通过对胡椒碱生物利用度进行研究,其生物利用度为59.95%,在后期临床研究时可考虑口服给药方式。3.抗肿瘤化合物CYD1在SD大鼠体内代谢产物研究采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术,分别对SD大鼠（n=4）单剂量尾静脉注射给药CYD1前后收集的血浆,尿液和粪便样品进行分析并鉴定代谢物。总共发现了除原型药物CYD1外的13个代谢产物,其中3个Ⅰ相代谢产物和10个Ⅱ相代谢产物。结果表明,CYD1主要通过Ⅱ相代谢在粪便中消除。乙酰化、甲基化和氧化还原是其主要的代谢方式。