桦褐孔菌多糖提取及花椒生物碱成分研究

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本文对桦褐孔菌多糖提取工艺和花椒生物碱提取及纯化工艺进行了研究,并且利用多种色谱技术(正相和反相硅胶、PTLC和Sephadex LH-20等)从花椒果皮中分离得到了 8个化合物,用多种波谱分析方法(1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HSQC、HMBC、NOESY和MS等)鉴定了化合物的结构,包含3个新化合物。主要研究结果如下:1.对桦褐孔菌多糖提取工艺进行了深入研究,优化了提取工艺,并对提取物中的重金属含量进行了测定,为桦褐孔菌相关产品开发提供了基础。研究在单因素实验基础上,采用四因素三水平的响应面分析法对桦褐孔菌多糖的提取工艺进行了优化研究。研究结果显示,桦褐孔菌多糖提取的优化工艺条件为:乙醇浓度为31%、提取温度为95℃、提取时间为2.5h、液料比为30:1。在该条件下的响应面预测桦褐孔菌粗多糖提取率为33.6%,粗多糖中多糖含量18.8%,菌粉中多糖含量为6.177%。与纯水提取工艺比较,粗多糖提取率提高了近2倍(17%),多糖含量提高了 2.9倍(2.068%),并且大大降低了提取物中重金属的含量。2.采用酸水提取法、乙醇水提取法、酸化乙醇水提取法对花椒样品进行提取,通过对提取物的成分和提取率进行检测,结果显示各方法提取到的主要成分相同,提取率不同,提取率由大到小依次为:酸化乙醇水提取法>乙醇水提取法>酸水提取法,最佳提取工艺条件确定为:乙醇浓度70%、0.4%HCl、提取时间4h、液料比15:1、提取次数2次、萃取4次,总生物碱的提取率为8.3%。此提取方法在提取效果相同的情况下,粗提取率最高。3.利用NKA-9大孔吸附树脂研究了对花椒生物碱吸附纯化的条件,通过薄层色谱和高效液相色谱对纯化结果进行分析。结果表明,用NKA-9大孔吸附树脂纯化花椒生物碱的条件为:将花椒提取液碱性条件下上柱吸附4h,然后依次用3倍柱体积的水,50%、70%的乙醇。70%乙醇洗脱部分为纯化后的生物碱;纯化后的生物碱主要有三种,通过高效液相分析,这三种生物碱的峰面积可达90%左右。4.对花椒果皮提取物的氯仿萃取部分,采用多种色谱技术(正相和反相硅胶、PTLC和Sephadex LH-20等)进行分离化合物,利用现代波谱分析技术(1HNMR、13CNMR、MS等)对得到化合物进行了鉴定,共分的8个酰胺类化合物,其中3个为新化合物。
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