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前言 在胸部肿瘤的放射治疗中，肺组织往往会受到一定剂量的照射，造成不同程度的放射损伤。肺组织放射性损伤是肿瘤放射治疗中的严重并发症之一，其发生机制尚不完全明了。过去认为产生放射性肺损伤的主要因素是照射体积与剂量、分割方式、以及是否应用化疗药和原有肺疾病，但未能解释为什么有些人发生有症状的放射性肺炎或肺纤维化而有些人则不发生，因此放射性肺损伤在很大程度上限制了放射治疗在许多肿瘤临床上的应用。研究表明，转化生长因子β1（TGF-β1）具有多种生物学功能，在正常组织放射损伤中，生物学因素转化生长因子β1可能起了关键性作用。本研究通过动物实验探讨了TGF-β1在血清中的表达与正常鼠肺组织放射性损伤的关系，从生物学角度研究了放射性损伤的原因，以期指导临床放射治疗方案的制定。 实验材料 实验动物：健康雄性Wistar大鼠33只，由中国医科大学实验动物中心提供，体重180±20g。 主要仪器：美国产Varian600c No258 6MV直线加速器，由辽宁省肿瘤医院提供。ELISA检测仪器：DG-3022半自动酶标仪（国营华东电子管厂），波长450nm。 试剂：大鼠单抗试剂盒（R&D Systems公司产品）。磷酸盐缓冲液（PBS液）。 自制大鼠固定架。 实验方法 动物照射实验：将33只实验大鼠随机分为4个组，前3个组为实验组，每组10只，分别单次照射10 Gy、20 Gy、30Gy；第4组3只为空白对照组。实验组鼠于照射后观察大鼠的呼吸频率，照射前及照射后第2和第4周时，分别经大鼠尾静脉取外周血200一300闪，于4℃下2000甲m离心10分钟，取上清液，一70℃低温冰箱内保存，待检。空白对照组也于相应时间时，观察呼吸频率并取外周血，待检。 动物照射方法:大鼠麻醉采用2%戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉，用药剂量为50m扩kg。用自行设计的大鼠固定架将大鼠固定，用射线能量为6Mv的X线进行外照射。源皮距（SSD）1米，剂量率为ZGy/min，照射野面积为2.5 x 1 .SCm，包括全部右肺在射野内。 TGF一日1的测定:采用双抗体夹心ELISA法检测血清TGF一p，含量。具体操作步骤如下:（l）提前30分钟从冰箱中取出试剂盒及样品，平衡至室温;浓缩洗涤液用双蒸水稀释，标准品及质控用标准品稀释液及质控稀释液稀释，（2）每孔加人100闪样品或不同浓度标准品或质控，（3）每孔加人400闪PBS液，重复洗板3次，每次均需在吸水纸上拍干，（4）每孔加人100闪TGF一日，单抗BAF一240，室温下孵化20分钟，甩干液体，每孔加入400闪PBS液，重复洗板3次，每次均需在吸水纸上拍干，（5）每孔加人100川底物A、B（各50闪）混合液，避光室温20一25分钟，每孔加人100闪终止液，混匀后30分钟内于酶标仪45Onm处读取结果。 统计学方法:照射前、后血清中TGF一pl平均水平用又*s表示，两样本均数用t检验，多个样本均数用F检验，统计处理采用SPSSH，5软件包。结果 1.放射损伤临床表现 大鼠照射后，肺损伤的症状主要表现为呼吸急促和呼吸频率增快。其中10Gy组表现不明显，呼吸频率升高较轻，且出现时间较晚。而20Gy组、30Gy组表现明显，呼吸频率升高较早。放射损伤的程度与照射剂量成正比，即照射量大者症状出现早，持续时间长，损伤表现明显。而放射剂量小者损伤表现较轻。 2.血清标本TGF一p，的测定结果 随着照射剂量增加及时间延长，血清TGF一p:水平呈升高趋势。 各剂量组不同时间TGF一日，血清水平比较 （l）IOGy组 照射前与照射后二周比较，差异有显著意义（t二一6.53，P<0.01）。照射前与照射后四周比较，差异有显著意义（t二一8.18，P<0.01）。照射后二周与照射后四周比较，差异有显著意义（t二一6.24，P<0.01）。 （2）20Gy组 照射前与照射后二周比较，差异有显著意义（t二一7.42，P<0.01）。照射前与照射后四周比较，差异有显著意义（t二一10.65，P<0.01）。照射后二周与照射后四周比较，差异有显著意义（t二一6.19，P<0.01）。 （3）30Gy组 照射前与照射后二周比较，差异有显著意义（t二一5.37，P<0.01）。照射前与照射后四周比较，差异有显著意义（t二一8.23，P<0.01）。照射后二周与照射后四周比较，差异有显著意义（t=一8.72，P<0.01）。 （4）对照组 血清最高达2.80n扩ml，最低达2.06n扩耐，前后比较无显著意义（t二一0 .143，P>0.05）。 （5）各剂量组之间比较 照射前F二1.003，P>0.05说明样本之间无显著差异，（即实验分组合理），照射后二周F二0.103，P>0.05说明不同剂量组之间无显著意义。照射后四周F二0.051，P>0.05不同剂量组之间无明显意义。讨论 肺组织放射性损伤是肿瘤放射治疗中的严重并发症，由放射性肺炎和放射性纤维化两部分组成。急性放射性肺炎和慢性肺纤维化是一个病程的两个阶段。大剂量照射后，肺损伤的早期反应是渗出，这是由于照射引起肺泡壁通透性的改变。放射性肺炎的特征是肺泡毛细血管壁界面失去平衡，造成肺泡膨胀不全，血液漏入肺泡腔内造成出血。放射性肺损伤第二阶段是肺放射性纤