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生长激素(growthhormone,GH)是在腺垂体中合成的一种蛋白质类激素,几乎能作用于所有的组织,调节细胞的代谢并具有脂解作用。当生长激素分泌过多时,会引起巨人症和肢端肥大症;当生长激素分泌过少时,将导致侏儒症。所以将GH保持在稳定且合适的水平以维持生理稳态具有十分重要的意义。GH的生成主要受生长激素释放激素(growth hormone regulating hormone,GHRH)和生长激素释放抑制激素(growth hormone release-inlease-inhibiting hormone,GHRIH)这两种激素调控。除了这两个经典的调节因子外,各种神经递质、激素或细胞因子在GH分泌中也起作用。因此,明确参与GH调节的分子机制至关重要。circular RNA(circRNA)是一类内源性长链非编码RNA,目前已有大量研究证明circRNA在不同的物种和细胞系中具有不同生物学功能,其中被研究最多的是circRNA具有ceRNA的功能,可以通过miRNA反应原件(MRE)与大量miRNA相结合并影响miRNA对其靶基因的结合能力,进而负性调节该miRNA的生物学功能。但是,circRNA是否参与GH调控,影响哺乳动物的生长发育尚且未知。本研究通过双荧光素酶报告系统和转染实验,分析了 miR-543-5p与GH的作用关系;应用生物信息学筛选出大鼠腺垂体中与miR-543-5p存在结合位点的circRNA。并命名为circAgtpbp1;构建过表达circAgtpbp1质粒和设计siRNA分析circAgtpbp1对腺垂体GH分泌的潜在影响;双荧光素酶报告系统和RIP实验等验证circAgtpbp1与miR-543-5p的相互作用。我们的结果表明:1.miR-543-5p可以靶向抑制大鼠腺垂体GH的分泌。大鼠的不同组织中,在腺垂体中miR-543-5p显著高表达;同时miR-543-5p在性成熟大鼠腺垂体中低表达。双荧光素酶报告系统和miR-543-5p转染实验证明miR-543-5p可以抑制大鼠腺垂体GH分泌。2.circAgtpbp1可以作为miR-543-5p的分子海绵调控大鼠腺垂体GH的分泌。我们通过生物信息学筛选到与miR-543-5p存在靶向结合位点的circAgtpbp1进行后续实验。通过序列比对确定circAgtpbp1来源于大鼠的17号染色体,通过使用PCR、琼脂糖凝胶电泳和sanger测序鉴定了 circAgtpbp1。再之后通过敲降和过表达circAgtpbp1,Gh1基因的表达水平和GH激素的分泌水平都受到了影响,表明circAgtpbp1对GH分泌具有潜在的调控能力。RIP实验和双荧光素酶报告系统证明circAgtpbp1与miR-543-5p具有靶向关系,拯救实验证明circAgtpbp1可以通过吸附miR-543-5p调控GH激素的分泌。综上所述,本研究分析了 circAgtpbp1通过竞争性结合miR-543-5p调控大鼠腺垂体GH的分泌,解析大鼠腺垂体中circRNA参与调控动物生长发育的方式,为进一步解析调控垂体激素分泌的生物学机制提供理论支持。