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目的:通过分析肝内胆管结石中细菌DNA,探讨微生物尤其是幽门螺杆菌在胆色素结石形成中的作用。分析肝内胆管结石中的胆色素含量,探讨幽门螺杆菌感染与结石中胆色素含量的相关性。 方法:在无菌条件下收集肝内胆管结石患者胆色素结石,从48例胆汁细菌培养阴性的肝内胆管胆色素结石中提取细菌DNA,应用套式聚合酶链反应技术从中特异性地扩增细菌DNA片段,以16S rRNA基因序列对照分析鉴定细菌种类,同时采用重氮法检测结石内胆色素含量。在无菌条件下收集肝内胆管结石患者的胆管组织30例以及正常的胆管组织20例,非胆管结石患者设为正常对照组,应用套式聚合酶链反应技术从中特异性地扩增幽门螺杆菌DNA片段,以琼脂糖凝胶电泳分析,并作DNA测序。 结果:42例(87.5%)胆色素结石中有细菌存在,12例(25%)为与幽门螺杆菌相似的片段,10例(20.83%)为与大肠杆菌相似的片段,8例(16.67%)为与痤疮丙酸杆菌相似的片段,5例(10.42%)为与铜绿假单胞菌相似的片段,另有7例(14.58%)片段具有多样性。并且,在6例细菌DNA检测阴性的结石中,胆色素含量为83.4±5.3;在42例细菌DNA检测阳性的结石中,胆色素含量为152.0±12.8,二者之间差异有显著性(P<0.01)。在幽门螺杆菌DNA阳性的结石中胆色素含量为250.0±12.2,在大肠杆菌DNA阳性的结石中胆色素含量为163.0±5.3,在痤疮丙酸杆DNA阳性的结石中胆色素含量为172.0±7.5,在铜绿假单胞菌DNA阳性的结石中胆色素含量为169.0±7.2,幽门螺杆菌组与其他各组比较差异有显著性(P<0.05)。在肝内胆管结石患者的胆管组织中幽门螺杆菌DNA的阳性率为40%,在正常的胆管组织中幽门螺杆菌DNA的阳性率为10%,二者之间差异有显著性(P<0.01)。 结论:胆色素结石是多种细菌混合感染的过程,并且结石内胆色素含量与细菌感染尤其是幽门螺杆菌感染密切相关,而幽门螺杆菌在肝内胆管胆色素结石形成中发挥重要的成核作用。