稀有鮈鲫卵黄蛋白原的分子克隆以及肾上腺素受体激动剂对其表达的影响

来源 :中国科学院水生生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunplusit
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硬骨鱼的卵黄蛋白原(Vitellogcnin,VTG)是一个由多个保守区域组成的磷脂蛋白大分子,一般认为它是受雌激素刺激而产生的卵黄蛋白(Yolkprotein,YP)的前体。我们用1713-雌二醇(estradiol,E2)溶液浸泡稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus),提取其肝脏RNA,构建了稀有鮈鲫肝脏cDNA文库,并且从中鉴定出5个编码卵黄蛋白原的克隆。利用从稀有鮈鲫肝脏cDNA文库中得到的4个VTG cDNA的部分序列信息以及cDNA末端快速扩增(rapid—amplification of cDNA ends,RACE)技术,我们得到了稀有鮈鲫vtgAol的全长序列。通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),我们可以观察到17β-雌二醇可以明显诱导稀有鮈鲫肝脏中vtgAol的表达。一般认为,vtgAol转录体主要在肝脏中表达。然而,在我们的实验中,我们在心脏——这个意想不到的地方也发现了一定程度的vtgAol表达。通过RT-PCR和整体原位杂交(whole mount insitu hybridization)分析,我们证实了vtgAo在心脏中的表达。用α-肾上腺素受体激动剂去氧肾上腺素(phenylephrine,PE)和β-肾上腺素受体激动剂异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)处稀有鮈句鲫,表明心脏中vtgAol的表达可受肾上腺素受体激动剂抑制。我们知道哺乳动物心肌细胞在代谢过程中能够卸载胞内多余的脂质,这是由哺乳类动物中的载脂蛋白B(apolipoproteinB,apoB)通过“反向甘油三酯转运(reverse triglyceride transportation)”的方式而进行的。我们所观察到的稀有鮈鲫这种硬骨鱼心脏能够表达卵黄蛋白原,提示了它可能具有与在哺乳类动物中同源蛋白apoB相类似的心脏保护作用。我们的实验结果表明:硬骨鱼体内卵黄蛋白原不仅可以通过雌激素诱导而产生,而且也可以由肾上腺素信号诱导途径所调节。
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