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目的:运用组织芯片技术,研究肺癌P53通路和Rb通路中多个基因的表达和临床特性的关系。 方法:收集226例肺癌标本并以23例患者正常肺组织作为对照,制作肺癌组织芯片,采用S-P免疫组化方法,检测肺癌P53通路和Rb通路中8个基因的表达。 结果:1.制备成功3个肺癌阵蜡块。 2.P53通路相关基因的蛋白表达。在肺癌组织中,P53、P63、MDM2、P21基因阳性表达较强,在正常肺组织中,4种基因均以缺失表达为主,其中,P53、P21基因表达完全为阴性。与正常肺组织相比,P14基因在肺癌中则以失表达为主(P<0.01)。在NSCLC中,MDM2、P14、P21、P63基因表达水平显著高于SCLC(P<0.01)。在低分化肺癌中,P53、MDM2基因表达水平显著高于其在中高分化的肺癌的表达(P<0.01);而P21基因则是在中高分化肺癌中的表达显著高于其在低分化中的表达(P<0.01)。在有淋巴结转移的肺癌中,P14、P21阳性率分别为38.6%(51/132)和51.5%(68/132),无淋巴结转移的肺癌中,其阳性率分别为77.7%(73/94)和70.2%(66/94),相比有显著性差异(P<0.01);而P53、MDM2在有淋巴结转移的肺癌中的阳性率为69.7%(92/132)和73.5%(97/132),显著高于其在无淋巴结转移的肺癌中的阳性率33.0%(31/94)和26.6%(25/94)(P<0.05)。在临床分期方面,P53、MDM2、P21基因在Ⅰ期和Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期的表达亦有显著性差异。 3.P16、Rb在肺癌中以缺失表达为主,其中,P16在NSCLC丢失明显,丢失率为48.9%(91/186),SCLC丢失率为7.5%(3/40);Rb在SCLC丢失明显,丢失率为85%(34/40),而在NSCLC丢失率为23.7%(44/186),CDK4在不同组织类型、淋巴结有无转移及临床分期方面的表达无明显差异性,但在高分化肺癌中的阳性率为46.4%(26/56),和其在中分化和低分化肺癌中的阳性率相比(分别为61.4%和73.6%),有显著性差异。在Ⅰ期和Ⅱ期肺癌中,P16的阳性表达率为68.3%(13/41)和72.6%(53/73),与其在Ⅲ期肺癌阳性率45.5%(45/99)及Ⅳ期肺癌阳性率46.2%(6/13)相比较,有显著性差异(P<0.05)。 结论:1.组织芯片在肺癌相关基因检测中具有样本量大,检测指标多,工作耗时少,高通量等优点。硕卜学位论文肺癌组织芯片的制备和应用 2.P53相关基因中,P53基因的突变和P63、MDMZ、P21基因蛋白的过表达在肺癌发生中起重要作用。P63、MDMZ、P14、P21在NSCLC和SCLC中的表达具有显著性差异,说明P53相关基因在NSCLC和SCLC的发病过程中所起的作用不同。 3.P16和Rb基因失活在肺癌发生中起重要作用,P16蛋白丢失和Rb蛋白丢失分别在NSCLC和SCLC中占主导地位。 4.肺癌中P16和P14蛋白等共同低表达和突变型P53蛋白高表达,与肺癌的临床病理特征存在显著相关性,表明抑癌基因P16、P14和P53的表达失活或突变在肺癌的转移和临床分期中起重要作用。