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1目的基于回顾性数据挖掘分析类风湿关节炎（RA）寒湿痹阻证患者感受（SPP）、lnc RNA MIR22HG（简称MIR22HG）、疾病活动度指标、凋亡指标和凝血指标的变化,及健脾温阳通络方（JWP）:新风胶囊（XFC）联合五味温通除痹胶囊（WWT）对其的影响;基于细胞实验明确JWP通过调控MIR22HG改善RA细胞凋亡的作用机制。2方法2.1研究一:基于回顾性数据挖掘的RA寒湿痹阻证SPP变化及JWP的干预研究调取安徽中医药大学第一附属医院2020年3月-2021年9月风湿免疫科RA寒湿痹阻证住院患者的病例资料,进行回顾性数据挖掘和自身对照研究,观察SPP、MIR22HG、凋亡指标和凝血指标的变化,运用SPSS 23和SPSS Modeler18.0对RA寒湿痹阻证患者感受与实验室指标进行关联规则、相关性分析和二元Logistic回归分析,以及健脾温阳通络方对RA寒湿痹阻证患者SPP、MIR22HG、凋亡指标和凝血指标的影响。2.2研究二:基于过表达MIR22HG研究JWP含药血清对RA-PBMCs与RA-FLS共培养细胞凋亡的影响制备JWP含药血清,观察JWP含药血清对细胞活力、MIR22HG、凋亡指标、凝血指标的影响。收集RA寒湿痹阻证患者外周血并提取外周血单个核细胞（PBMCs）,将RA-PBMCs放置于Transwell小室的上室,RA-FLS放置于Transwell小室的下室,进行细胞共培养。分为四组:（1）RA-PBMC+RA-FLS,（2）RA-PBMC+RA-FLS+JWP含药血清,（3）RA-PBMC+RA-FLS+JWP含药血清+pc DNA3.1 NC,（4）RA-PBMC+RA-FLS+JWP含药血清+pc DNA3.1 MIR22HG。运用RT-q PCR法检测下室细胞中MIR22HG的表达;采用CCK-8法检测细胞抑制率;ELISA法检测上室上清液中细胞因子的表达;采用蛋白免疫印迹法（WB）检测下室细胞中caspase-3、Bax和Bcl-2凋亡蛋白的表达;采用SPSS 23软件统计数据。3结果3.1研究一:基于回顾性数据挖掘的RA寒湿痹阻证SPP变化及JWP的干预研究（1）RA寒湿痹阻证患者感受、MIR22HG、疾病活动度指标、凋亡指标和凝血指标的变化:与正常对照组相比,RA寒湿痹阻证SPP评分（SAS、SDS）升高,SPP评分（GH、RP、PH、SF、BP、RE、MH、VT）评分降低（P＜0.05）;疾病活动度指标（ESR、CRP、RF、CCP）升高（P＜0.05）;凋亡通路指标Caspase-3降低、MIR22HG升高（P＜0.05）;凝血指标PLT、FBG、D-D、PAF升高（P＜0.05）,PT、APTT、PGI2降低（P＜0.05）。（2）MIR22HG在RA寒湿痹阻证患者中的表达:ROC曲线结果显示,MIR22HG在RA寒湿痹阻证患者中表达升高,可以作为协助诊断RA的分子标志物（AUC=95%,P＜0.0001,95%CI:0.91-0.99）。（3）RA寒湿痹阻证SPP与MIR22HG、凋亡指标和凝血指标的相关性分析:结果显示,RA寒湿痹阻证患者SPP评分（VT、寒湿证积分、脾虚湿盛证积分、RA症状体征积分、VAS、SDS、BP、SF、PF和GH）与疾病活动度指标（ESR、CRP）凋亡指标MIR22HG、Caspase-3、凝血指标（FBG、D-D、PGI2、PT、TT、PLT、APTT、PAF）具有相关性（P＜0.05）。（4）RA寒湿痹阻证SPP与MIR22HG、凋亡指标和凝血指标的关联规则分析:结果显示,RA寒湿痹阻证患者SPP评分（SDS、VAS）与MIR22HG和PLT的升高有关联性,支持度均大于20%,最小置信度均大于60%,提升度均大于1（P＜0.05）。（5）RA寒湿痹阻证SPP与MIR22HG、凋亡指标和凝血指标的二元Logistic回归分析:结果显示,RA寒湿痹阻证SPP指标SAS、SF、GH与CRP、PAF、PGI2等具有相关性（P＜0.05、OR＞1）,提示CRP、PAF和PGI2是RA寒湿痹阻证SPP的危险因素。（6）RA寒湿痹阻证患者治疗前后SPP、MIR22HG、疾病活动度指标、凋亡指标和凝血指标的变化:与治疗前相比,RA寒湿痹阻证患者治疗后SPP评分:寒湿证积分、脾虚湿盛证积分、SAS、SDS、VAS、疾病活动度评分和RA症状体征积分降低（P＜0.05）,RP、GH、PF、SF、BP、RE、MH和VT评分升高（P＜0.05）;疾病活动度指标:ESR、CRP、RF、anti-CCP、Ig A和Ig M降低（P＜0.05）;凋亡通路指标:Caspase-3升高、MIR22HG降低（P＜0.05）;凝血指标:PLT、FBG、D-D、PAF降低（P＜0.05）,PT、TT、APTT、PGI2升高（P＜0.05）,提示机体处于凋亡不足和高凝的状态。（7）JWP与RA寒湿痹阻证SPP、MIR22HG、疾病活动度指标、凋亡指标和凝血指标的关联规则分析:关联规则结果显示,在最小支持度为20%,最小置信度为60%的条件下,JWP与RA症状积分、SF、RP、疾病活动度评分等SPP评分,与FBG等凝血指标,与CRP和ESR等疾病活动度指标的改善有强关联性（提升度均大于1）。3.2研究二:基于过表达MIR22HG研究JWP含药血清调控RA寒湿痹阻证PBMCs与FLS共培养细胞凋亡反应的作用（1）RA-PBMC和RA-FLS共培养对RA-FLS细胞活力的影响:筛选出RA-PBMC和RA-FLS的最佳共培养比例为2.5:1、最佳作用时间为48h。（2）JWP含药血清对RA-FLS细胞活力的影响:筛选出JWP含药血清作用于共培养细胞的最佳浓度为10%,最佳作用时间为48h。（3）JWP对RA-FLS中MIR22HG表达的影响:RT-q PCR结果显示,与RA-FLS组相比,经RA-PBMC刺激后,RA-FLS细胞的MIR22HG的表达升高（P＜0.05）;JWP干预后,RA-FLS的MIR22HG的表达降低（P＜0.05）。（4）回复实验:（1）RT-q PCR结果显示,与RA-PBMC+RA-FLS组相比,经JWP含药血清干预后,Bax m RNA表达升高、MIR22HG和Bcl-2m RNA表达降低（p＜0.05）;与转染pc DNA3.1-NC组相比,经转染pc DNA3.1-MIR22HG后,Bax m RNA表达降低、MIR22HG和Bcl-2m RNA表达升高（P＜0.05）。（2）WB结果显示,与RA-PBMC+RA-FLS组相比,经JWP含药血清干预后,Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase-3蛋白表达升高;与pc DNA3.1-NC组相比,pc DNA3.1-MIR22HG组Bcl-2蛋白表达升高,Bax和Caspase-3蛋白表达降低（P＜0.05）。与RA-PBMC+RA-FLS共培养组相比,经JWP含药血清或通路激动剂PETCM干预后,Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase-3蛋白表达升高（P＜0.05）。（3）ELISA结果显示,与共培养组相比,经JWP含药血清干预后,PAF降低、PGI2升高,与pc DNA3.1-NC组相比,转染pc DNA3.1-MIR22HG后PAF升高、PGI2降低（P＜0.05）;与RA-PBMC+RA-FLS组相比,经JWP含药血清或PETCM干预后,PAF降低、PGI2升高（P＜0.05）。4结论（1）RA寒湿痹阻证患者出现SPP评分异常、凋亡不足和高凝状态等改变,并伴有MIR22HG高表达,同时,SPP评分与MIR22HG、凋亡凝血及疾病活动度等实验室指标存在相关性,说明MIR22HG、凋亡凝血及疾病活动度指标是SPP评分异常的危险因素。（2）健脾温阳通络方干预后,RA寒湿痹阻证SPP评分和凋亡凝血等实验室指标均有改善,且健脾温阳通络方的使用与凋亡凝血等实验室指标的改善具有关联性。（3）健脾温阳通络方含药血清能降低共培养细胞中MIR22HG的表达,通过调节Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路促进细胞凋亡,同时能缓解高凝状态,改善RA疾病进程。